肝细胞癌患者肝组织及血清中GP73表达变化的实验研究

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目的:本实验以肝细胞癌(Hepaticcellular carcinoma,HCC)、肝胆管细胞癌、肝血管瘤、结肠癌、乳腺癌、肺鳞状细胞癌患者及正常人的血清及组织标本为研究对象,以免疫组织化学及酶联免疫吸附试验方法,检测肝细胞癌患者组织及血清中高尔基体膜蛋白-73(Golgiprotein73,GP73)的表达变化,通过其与其他疾病及正常组织相比较,同时研究血清中GP73含量与HCC患者的临床病理参数之间的联系,旨在初步探讨其诊断HCC的临床意义。  方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)SP法检测80例HCC,10例肝胆管细胞癌(cholangiocellular carcinoma, CCC)、20例血管瘤、20例结肠癌、20例乳腺癌、20例肺鳞状细胞癌和20例正常肝脏组织中 GP73蛋白的表达,其中正常肝脏组织来源于肝血管瘤。用夹心抗体酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定以上各组及转移性肝癌患者4例、乙型肝炎患者30例、乙肝后肝硬化患者20例、丙型肝炎4例的血清标本、40例健康志愿者血清中GP73的含量,统计各疾病患者的临床资料,用统计学方法进行分析在 HCC患者的组织及血清中GP73表达量与其他疾病及正常人GP73表达量的差异,并观察HCC患者血清中GP73含量与患者临床病理参数之间的关系,初步探讨GP73在诊断HCC的临床价值。  结果1、GP73蛋白在 HCC、肝胆管细胞癌、血管瘤、结肠癌、乳腺癌、肺鳞状细胞癌、正常肝组织的细胞浆中均有表达,正常组织中GP73仅表达于胆管细胞上皮,各组织中阳性率分别为85%(68/80)、40%(4/10)、15%(3/20)、25%(5/20)、15%(3/20)、35%(7/20)、15%(6/40);2、HCC组织中 GP73蛋白表达与其他组织相比,其阳性率明显高于其他疾病及正常组织,且 P均<0.05;3、正常健康献血者样本结果分析血清中GP73的含量,提示GP73的正常上限值为74.4μg/l,以正常组织及其他疾病血清中GP73含量为正常参考值,其正常上限值为89.1μg/l,以此为标准诊断 HCC的敏感性和特异性分别为73%和56%;4、各组织与血清中GP73蛋白表达量存在明显相关性,相关系数 r=0.705,且 P<0.05;5、GP73蛋白在肝细胞癌患者中的表达与患者是否合并有肝硬化、腹水、肿瘤临床病理分期及门静脉侵犯等有关(P均<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤数目均无关,P均>0.05。  结论1.GP73在各种组织及血清中均有表达,但在HCC中尤高;2.正常健康献血者样本中GP73的含量为参考值,经统计分析可知其正常上限值为74.4μg/l,若将其他非HCC疾病组一并纳入对照组,其血清中GP73含量的上限值为89.1μg/l,以后者为标准诊断HCC的敏感性和特异性分别为73%和56%。并肝硬化、腹水、肿瘤临床病理分期及门静脉侵犯有关。3.GP73表达量与患者是否。4.GP73是HCC的血清学肿瘤标记物之一,可用于HCC的临床诊断。
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