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研究目的和内容:视网膜母细胞瘤（Retinoblastoma，RB）是小儿最常见的原发性眼内恶性肿瘤，严重危害患儿的视力和生命，而RB的颅内或全身转移是RB患儿死亡的主要原因。有研究表明Rho/ROCK蛋白活性的改变与许多肿瘤细胞的增殖与侵袭密切相关，作为Rho的主要下游效应蛋白，ROCK-1和ROCK-2对活体或离体肿瘤细胞的运动和侵袭能力有重要调节作用。但是，关于ROCK蛋白在RB细胞增殖与侵袭中的作用目前尚不清楚。方法:采用RT-PCR和western blot方法检测RB细胞株（Y79）中ROCK-1和ROCK-2的mRNA和蛋白的表达情况；应用Lipofectamine2000将ROCK小分子干扰RNA (Small interfering RNA，siRNA)转染到Y79细胞中，观察RNA干扰（RNA interference，RNAi）后细胞中的ROCK-1和ROCK-2的mRNA和蛋白的表达抑制情况；运用ROCK抑制剂（Y-27632）和siRNA抑制ROCK蛋白的活性后，通过CCK-8细胞活性试验、matrigel细胞粘附试验和Transwell细胞侵袭试验，观察ROCK蛋白对RB细胞增殖、转移和侵袭能力的影响。结果:实验结果显示：在Y79细胞中有ROCK-1和ROCK-2mRNA和蛋白的表达，而且ROCK-1的表达要高于ROCK-2；siRNA介导的RNAi可以有效地抑制Y79细胞中ROCK-1和ROCK-2mRNA的表达，进而抑制ROCK-1和ROCK-2蛋白的表达；ROCK抑制剂（Y-27632）对Y79细胞的增殖能力没有影响，但可以显著地增加Y79细胞的粘附能力并降低其侵袭能力；ROCK-1siRNA也可以显著地增加Y79细胞的粘附能力并降低其侵袭能力，但ROCK-2siRNA对Y79细胞的粘附能力和侵袭能力没有影响。结论: ROCK-1蛋白在RB细胞转移与侵袭中起重要作用，很有可能成为治疗RB的新靶点。