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目的：建立自人外周血淋巴细胞(PBMCs)中记忆B细胞，分化和增殖特异性抗体分泌细胞（浆细胞）的体外诱导方法研究。 方法：采集两名曾接种过乙型肝炎疫苗3年和25年健康成年志愿者（Z和L）外周血，分离PBMCs，通过细胞因子（IL2、IL4和IL10）和TLR激活剂(CpG、R848)体外诱导活化，孵育6天后，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测培养上清中总抗体含量和抗原特异性抗体;同时用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)计数培养细胞中总抗体分泌细胞(ASCs)数量变化和抗原特异性抗体细胞的数量。 结果：活化第6日，ELISA检测对照组和两诱导组:CpG DNA2006联合IL-2、IL-4和IL-10（C组）和R848联合IL-2（R组）PBMCs培养上清液总IgG浓度分别为37.06ng/ml、80.87 ng/ml和85.97 ng/ml，C组和R组均明显高于对照组。取103、104、5×104、和105活化细胞，ELISPOT检测抗体分泌细胞(ASC)数量，结果显示，C组和R组均高于对照组，并且R组明显多于C组。以上证明，两种激活方法均能在体外诱导B细胞增殖，并且R组诱导效果更佳，确立R组为最优激活方案。用该方案活化两名乙型肝炎疫苗接种者PBMCs，ELISA比较活化诱导组和未诱导组特异性IgG含量变化，R组均显著高于对照组。不同数量细胞中，ELISPOT检测抗原特异性IgG抗体分泌细胞数量，R组明显高于对照组。 结论：确立诱导剂R848和IL-2为最优体外B细胞活化方案，能够有效地诱导外周血记忆B细胞体外扩增和分化抗原特异性浆细胞。