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鸭病毒性肝炎(Duck Hepatitis，DH)是由鸭病毒性肝炎病毒引起雏鸭的一种以肝脏肿胀、出血为主的急性烈性传染病，其病原是鸭肝炎病毒(DHV)，属于小核糖核酸病毒科，有3个血清型，我国主要流行的是1型鸭肝炎病毒。 先天性免疫系统是机体普遍的抗感染形式，先天性免疫覆盖宿主防御系统的很多领域，是宿主防御系统进化的一部分，是机体抵御病原体入侵的第一道防线，通过先天性免疫受体激活巨噬细胞，多核白细胞，和肥大细胞等。目前有许多病毒与宿主先天性免疫反应之间关系的报道，为了研究DHV致病力及鸭抗DHV先天性免疫反应，我们开展了如下研究: 1)Ⅰ型鸭肝炎病毒SH株分离鉴定及全基因组序列测定与分析。我们从上海市某鸭场发病鸭群中分离到1株DHV-1型强毒株，对其进行毒价测定、琼脂扩散试验和动物回归实验，结果显示:按103.41 ELD50/0.2 mL接种1日龄雏鸭，该毒株对雏鸭有明显的致病性，死亡率为60％，肝脏病变率为100％。经全基因组测序显示:该毒株长度为7652 nt，含626 nt的5'非编码区和314 nt的3'非编码区，编码一个2249aa大小的多聚蛋白。根据Blast比对发现，该毒株属于经典的DHV-1A群，与韩国经典强毒株R85952(99.7％)和中国分离强毒株HP-1(99.3％)的同源性最高。 2)一种1型鸭病毒性肝炎RT-LAMP检测方法的建立。我们利用1型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-1)特异的高度保守的3D基因引物，建立逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)检测1型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-1)。RT-LAMP检测方法可以检测从尿囊液中和感染鸭肝组织中提取的DHV-1 RNA，该检测方法的敏感性与RT-PCR相当，不能与其他禽病毒和禽细菌病原体产生交叉反应。除了可以通过溴化乙锭染色法凝胶电泳来检测外，也可以通过SYBR GreenⅠ染色后，肉眼观察RT-LAMP检测产物，这种方法可以应用到现场检测中。本研究结果表明，RT-LAMP检测方法可以作为一个有用的工具，用于家禽业对1型鸭病毒性肝炎病毒的监测。 3)年龄对DHV-1感染北京鸭致病性及先天性免疫反应中的作用。鸭肝炎病毒(DHV)主要侵害1周龄内雏鸭，而不感染3周龄以上的大鸭，可引起雏鸭严重疾病。这些差异可能部分由于DHV感染后的宿主反应差异引起的。为了了解这种差异，我们分别接种了1日龄和3周龄鸭，了解其病理变化及先天性免疫反应的不同，同时检测感染后24小时到72小时所有鸭肝脏病毒RNA水平。结果发现病毒引起的病理变化从没有临床症状到严重的典型鸭肝炎症状到死亡，1日龄雏鸭症状更严重，DHV感染能引起TLR3，TLR7，RIG-Ⅰ，MDA5，IFN-α的上调，3周龄感染鸭IL-6，OASL，IFITM1，ISG12转录水平均增加超过100倍，但是这些基因在感染的1日龄雏鸭却被诱导的少。我们目前的证据表明，3周龄鸭肝细胞细胞因子基础水平高，感染DHV后，病毒复制低，能诱发强大的先天性免疫反应。所以我们得出结论，年龄因素在DHV感染鸭致病性及先天性免疫反应中起重要的作用。 4)鸭肝炎病毒强弱毒株对鸭的致病性及早期宿主免疫反应研究。以往我们对鸭肝炎病毒的研究仅仅局限在一个毒株对鸭的致病性及宿主的免疫反应上，在本研究中，我们确定了不同毒力DHV株在1日龄(1D)雏鸭肝脏的致病力及先天性免疫反应不同。强毒SH株和致弱毒株FC64诱导不同的致病性，细胞凋亡，及免疫应答。采用实时荧光定量PCR进行基因表达分析，发现细胞因子信号有显著差异。两个病毒株均能诱导先天免疫反应，相比强毒株SH，致弱株FC64在感染后36小时，能诱导更高的细胞因子水平，包括IFN-α，IFN-β，IFN-γ，IL-6，IL-2，iNOS,IFITM1,ISG12，OASL等。强毒SH株在感染后36h可诱导肝细胞凋亡，而FC64感染雏鸭表现出很少或几乎没有肝细胞凋亡，所有的雏鸭存活到36h。常规的生化检测血清天冬氨酸转氨酶，丙氨酸转氨酶，碱性磷酸酶，γ-谷氨酰和总胆红素活性，结果表明，SH感染的雏鸭肝脏损害严重，而FC64感染的雏鸭肝功能检测正常。本研究的结果表明，两株DHV毒株，尽管感染后都能引起免疫应答，但其对鸭的致病力是不同的，病毒在鸭体内的复制和存活也是不同的，这可能与毒株的毒力有关。攻毒保护性试验结果也表明，接种弱毒FC64的雏鸭能抵抗DHV强毒SH的攻击，且没有明显的临床症状。感染弱毒FC64的雏鸭，病毒在肝脏复制速度较慢，只表现出轻微的病理变化，无临床症状也无死亡，且能引起更高的先天性免疫反应，以上结果表明FC64已成功致弱，有可能作为鸭肝炎病毒的候选疫苗株。目前的研究为提供DHV的疫苗的开发提供了可靠依据。