【摘 要】
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本文对BP08菌株进行了菌种鉴定,测定了其最佳培养基组分和最适培养条件,测定了BP08菌株的抗菌谱,并对其代谢产物进行了初步的研究。
通过16S rDNA序列测定和系统发育分
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本文对BP08菌株进行了菌种鉴定,测定了其最佳培养基组分和最适培养条件,测定了BP08菌株的抗菌谱,并对其代谢产物进行了初步的研究。
通过16S rDNA序列测定和系统发育分析、形态生理生化鉴定方法,结果表明BP08菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。
以生物量和发酵液拮抗水稻纹枯病原菌活性为指标,通过单因素试验,对培养基组成和培养条件进行优化,结果表明培养基最佳碳源、氮源、无机盐分别为葡萄糖、牛肉膏、CaCl2;最适培养条件为发酵温度30℃、初始pH值7.0、接种量为3％、装液量100mL/L、180r/min条件下,菌株生长量及拮抗水稻纹枯病原菌的活性均达到最大值。
抗菌谱结果表明BP08菌株对水稻纹枯病原菌(Rhizoctonia solani)、玉米小斑病原菌(Bipolaris maydis)等6种植物病原菌有很好的抑制作用。
不同溶剂对发酵液进行萃取,试验发现,BP08菌株次级代谢产物中的抑菌物质极性较大,适合用正丁醇提取;正丁醇萃取粗提物对水稻纹枯病原菌生长的抑制中浓度(EC50)为167.81 mg/L;通过温度对BP08发酵粗提物的稳定性和抑菌活性的测定,发现抑菌物质在80℃下抑菌活性没有明显改变,80℃往上抑菌物质的活性随之下降,121℃高温处理20min后,仍有较好的活性;pH值稳定性研究表明粗提物在中性环境下抑菌效果最好;粗提物在常温下保存半年抗菌活性没有明显下降;对BP08菌株的代谢产物进行分离,得到4个物质,经过核磁共振(NMR)分析,确定3个物质结构分别是:色氨酸、尿嘧啶、胸腺嘧啶,化合物4结构待定。
芽孢杆菌有很强的适应性和抗逆能力,易于工业化生产和贮藏。短小芽孢杆菌BP08代谢产物抑菌活性高,稳定性好,作为一种潜在的生物农药,具有开发利用价值。
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