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本文旨在研究奶牛瘤胃中玉米秸秆分解菌的筛选、鉴定,及其对奶牛瘤胃发酵和生产性能的影响,分为4个试验完成。试验一玉米秸秆高效分解菌株的筛选及产酶条件的优化。为了从瘤胃中筛选出对玉米秸秆有高效分解作用的目的菌株,并优化其产酶条件,本试验首先以玉米秸秆为粗饲料饲喂4头安装有永久瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛20d,促进瘤胃中目标菌群的生长。然后取4头奶牛的瘤胃液混合,进行富集培养,使目标菌迅速扩繁。其次采用刚果红平板法对产纤维素酶的菌株进行初筛,选取透明圈大的菌株进行玉米秸秆摇瓶复筛,得到一株对玉米秸秆有高效分解作用的目标菌株。通过对目标菌的产酶条件的优化,得到在38.5℃条件下,该菌株的最适产酶条件为接种量为8%、氮源为NH3NO3、吐温80含量为1%。试验二玉米秸秆高效分解菌株的鉴定。为了确定试验一中所得目标菌的菌属,本试验采用PCR分子鉴定法对目标菌进行16rRNA基因序列检测,得知目标菌共有1500个碱基片段,编码500个氨基酸,AT/CG=687/813。BLAST同源性比对结果显示目标菌株为产碱菌科,与Kerstersia菌属的相似度为99%,与Bordetella菌属的相似度为96%,本次命名为KB菌。试验三KB菌对奶牛瘤胃发酵的影响。本试验旨在研究KB菌对奶牛瘤胃发酵的影响,选用3头体况良好,体重、日产奶量均相近,安装有永久性瘤胃瘘管的健康泌乳中期荷斯坦奶牛,试验分3组,饲喂3种不同处理的日粮,即0cfu/d(对照组)、0.7×1011cfu/d(试验组1)和1.4×1011cfu/d(试验组2)。采用3×3拉丁方试验设计,试验分为3期,每期预试期15d,正试期3d。饲喂KB菌后,测定瘤胃内环境指标(pH值、原虫数量、细菌总数、氨态氮浓度、挥发性脂肪酸浓度、菌体蛋白浓度)。结果显示,试验组瘤胃液pH值(试验组1:6.49;试验组2:6.56)、氨态氮(试验组1:14.11;试验组2:14.64)、挥发性脂肪酸(VFA)浓度(试验组2:101.76)、乙酸浓度(试验组1:67.38;试验组2:68.31)与对照组(pH值:6.43、氨态氮:12.89、VFA浓度:96.7、乙酸浓度:64.42)相比均显著提高(P<0.05),而瘤胃原虫数,丙酸,丁酸和乙/丙酸比例与对照组相比无显著差异(P>0.05)。试验四KB菌对奶牛生产性能的影响。本试验旨在研究KB菌对奶牛生产性能的影响,选用18头体况良好,胎次相同,体重、日产奶相近的泌乳中期荷斯坦奶牛,随机分为3个处理组,每个处理6头奶牛,每头奶牛为1个重复。饲喂3种不同处理的日粮,即0cfu/d(对照组)、0.7×1011cfu/d(试验组1)和1.4×1011cfu/d(试验组2),试验预试期10d,正试期40d。测定产奶量及乳成分。饲喂KB菌40d后,4%标准乳产量与对照组(19.18kg/d)相比,试验组1(19.27kg/d)、试验组2(21.34kg/d)显著(P<0.05)提高。试验组2的乳蛋白率(3.54%)、乳脂率(3.72%)差异显著(P<0.05),各处理乳糖率、非脂乳固体物差异不显著(P>0.05)。综上所述,本次筛选所得的KB菌对玉米秸秆有高效分解作用,38.5℃下该菌株的最适产酶条件为接种量为8%、氮源为NH3NO3、吐温80含量为1%。BLAST同源性比对结果显示目标菌株与产碱菌科的Kerstersia菌属及Bordetella菌属的相似度分别为99%、96%,对稳定奶牛瘤胃内环境,有一定的作用,并能提高奶牛生产性能。