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本篇论文研究来源于国家自然科学基金青年基金“基于中药多成分整体性特征研究桔梗汤的配伍机制”(81001499)。桔梗汤由桔梗和甘草两味中药组成,最早出自张仲景《伤寒论》,是治疗咽喉痛的基本方,临床治疗咽喉痛诸方大多由此方加味而成。桔梗味苦、辛,平,归肺经,具有宣肺利咽,祛痰排脓的作用；甘草味甘、平,归心、肺、脾、胃经,能补脾益气,祛痰止咳,清热解毒,缓急止痛,调和诸药。此二者伍用,取甘草之泻火解毒以固本,取桔梗之宣通肺气以化痰止咳,标本兼顾,相得益彰,故其宣肺止咳,利咽解毒,祛痰排脓之功增强。从现代医学的角度来看,桔梗汤的宣肺止咳,利咽解毒,祛痰排脓的功效与抗炎、祛痰等作用有关,其主要活性成分为桔梗皂苷和甘草皂苷。在文献研究的基础上,本课题从药代动力学的角度较为系统地进行了桔梗一甘草药对中主要有效成分的体内相互作用研究,以期探讨两者的配伍机制。选取桔梗中的皂苷类成分——桔梗皂苷D,甘草中主要皂苷类成分——甘草酸,及主要黄酮类成分一一甘草苷、甘草素等作为研究对象,比较桔梗、甘草配伍前后体内药代动力学特征变化,并从吸收和代谢的角度探讨两者配伍后可能导致有效成分药代动力学变化的原因。本课题建立了桔梗汤的指纹图谱和定量分析方法,从桔梗汤中初步鉴定出80个化学成分,其中19个来源于桔梗,61个来源于甘草。定性、定量分析研究表明桔梗、甘草配伍前后各自主要有效成分的化学结构和含量未发生明显变化。建立了桔梗汤、桔梗及甘草体内多成分LC-MS/MS定量分析方法。药代动力学研究结果显示：桔梗、甘草配伍后,甘草可使桔梗皂苷D的药时曲线下面积(AUC(0-t)从(89.0±45.4μg·L-1·h)提高至(540.21±222.15μg·L-1·h),提高了6倍；去芹菜糖-桔梗皂苷D的AUC(0-t值从(81.3±27.8μg-L-1·h)提高至(181.3±73.5μg·L-1·h)。桔梗组中桔梗皂苷D2的血药浓度低于定量限,而桔梗汤组中其血药浓度可在8h内进行定量检测,因此桔梗皂苷D2的AUC(0-t)值从0提高至(36.3±11.0μg·L-1·h),说明甘草能够显著提高桔梗皂苷类成分的口服相对生物利用度。桔梗可使甘草中的皂苷类成分甘草酸的AUC(0-t)值从(13531±4038μg·L-1·h)提高至(41241±10290μg·L-1·h),其代谢产物甘草次酸的AUC(0-t)值从(40354±9018μg·L-1·h)提高至(117530±20640μg·L-1·h),均提高了3倍；桔梗亦可使甘草中的黄酮苷类成分甘草苷的AUC(0-t)值从(302±58.1μg·L-1·h)提高至(1105±270μg·L-1·h),提高了3倍,异甘草昔从(75.3±17.6μg·L-1·h)提高至(136±36.5μg·L-1·h),而相应的苷元成分甘草素则从(533±191μg·L-1·h)降低至(304±59.1μg·L-1·h),异甘草素从(202±54.4μg·L-1·h)降低至(120±31.5μg·L-1·h)。总体而言,桔梗能够显著提高甘草黄酮类、皂苷类成分的口服相对生物利用度。药代动力学研究与前期开展的抗炎药效学实验结果结果基本一致,两者配伍后具有协同增效的作用。本课题通过建立Caco-2细胞模型和大鼠肠道菌群模型,研究桔梗-甘草配伍主要有效成分的吸收、代谢机制。Caco-2田胞吸收模型实验结果显示,桔梗和甘草中主要有效成分的表观渗透系数(Papp)在配伍前后未表现出显著性差异(P>0.05),由此推测桔梗-甘草的配伍对有效成分的吸收影响较小。大鼠肠道菌群代谢模型实验结果表明,桔梗、甘草配伍后,桔梗皂苷、甘草黄酮苷和甘草皂苷类成分的代谢趋势均有不同程度的降低,推测可能是由于桔梗皂苷和甘草黄酮苷、皂苷均属于糖苷类成分,易受到β-D-葡萄糖苷酶等代谢酶的影响(脱糖基代谢),配伍后这些糖苷类成分的代谢均受到一定程度的竞争性抑制,这可能是桔梗汤有效成分群生物利用度提高的一个主要因素。