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目的:
通过生物致炎剂注入法建立CPID大鼠模型,观察化瘀固本方和康妇炎胶囊对CPID模型大鼠的对比研究,观察CPID模型大鼠盆腔内生殖器官变化,在光镜下观察左侧输卵管病理形态学变化。S-P法检测TGF-β1、EGF免疫组化表达、Real-time PCR法检测ICAM-1mRNA、TNF-αmRNA表达及wes tern blot法检测NF-kB蛋白测定,来探讨化瘀固本方对CPID模型大鼠的治疗作用及机制。
方法:
1、用生物致炎剂和化学致炎剂分别诱导3组CPID大鼠模型,以检验模型的建立成功并进行筛选,为化瘀固本方治疗CPID模型大鼠奠定实验模型基础。
2、将40只成年未孕sD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、化瘀固本组、康妇炎组。生物致炎剂官腔注入法造模后第21天即分组灌胃给药,灌胃14天后肉眼观察盆腔内生殖器官变化并评分,在光镜下观察左侧输卵管病理形态学变化并评分。
3、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氮罐保存,以S-P法检测CPID模型大鼠TGF-β1、EGF免疫组化的表达水平。
4、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氮罐保存,以Real-time PCR法检测CPID模型大鼠ICAM-1mRNA、TNF-αmRNA的表达水平。
5、灌胃14天后,于近子宫处摘取左侧部分输卵管,取材标本液氮罐保存,以Western blot方法检测CPID模型大鼠NF-kB蛋白表达水平。
结果:
1、生物致炎剂注入法以常见的CPID致病病原微生物作为致炎剂来制作动物模型,见子宫及左侧输卵管炎性充血、红肿,表面均有炎性渗出,部分呈粘液状,左侧输卵管明显增粗、弯曲,与子宫表面有少许膜样粘连,典型的慢性盆腔炎症状出现。
2、模型组大鼠的盆腔内生殖器官评分水平、左侧输卵管病理形态学评分水平与空白组比较有极显著性有差异(P＜0.01),化瘀固本方组与模型组比较差异有极显著性(p＜0.01),与康妇炎组比较差异有显著性(P＜0.05),与空白组比较差异无显著性(P＞0.05)。
3、CPID模型大鼠输卵管组织中TGF-β1、EGF的表达明显降低,化瘀固本方干预后检测有明显升高趋势,其表达调节作用优于康妇炎组。
4、CPID模型大鼠输卵管组织中ICAM-1mRNA、TNF-αmRN的表达显著升高,化瘀固本方能下调CPID模型大鼠的输卵管组织中ICAM-1mRNA、TNF-αmRNA的表达,相对于康妇炎组有较强优势。
5、CPID模型大鼠输卵管组织中NF-kB蛋白表达明显增加,化瘀固本方药物干预后NF-kB蛋白表达水平有降低趋势,并优于康妇炎组。减轻了CPID模型大鼠输卵管组织的炎性程度。
结论:
化瘀固本方可通过对CPID模型大鼠输卵管组织的粘连相关细胞因子的调节,抑制其启动多种细胞因子的转录及表达,有效抑制盆腔炎模型大鼠炎症,减轻了CPID模型大鼠盆腔及输卵管组织的炎性程度,改善了解盆腔粘连,改善机体免疫功能。活血化瘀、清利湿热药物对粘连相关细胞因子的调节明显优于康妇炎组,其在改善慢性盆腔炎症粘连的免疫调节方面表现出优势。