大鼠萎缩腮腺组织再生过程初步研究

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目的:探究腮腺导管结扎诱导腺体萎缩后腺体再生过程中组织学变化,分析PCNA(增殖细胞核抗原)、P53在腮腺再生进程中的表达及意义。方法:将wistar大鼠随机分为实验组和对照组,结扎实验组大鼠腮腺主导管,分别于结扎7天(A组)、14天(B组)、21天(C组)后实现腮腺导管再通,并于再通后第 0、1、3、5、7、10、14、21、28、60、90 天(A、B、C 各组分别记为A0……A90,B0……B90,C0……C90)获取腮腺组织,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察组织形态学变化;应用免疫组织化学、实时荧光定量PCR(Real-Time PCR,RT-PCR)、免疫蛋白印记(Western Blot)等方法探究腮腺组织中PCNA、P53的表达变化;并应用Tune1荧光检测观察腮腺组织细胞凋亡规律。结果:导管结扎再通第0天,腮腺腺泡萎缩、减少,导管扩张、管腔增大,随着再通时间延长,A、B组腺泡细胞逐渐增多,导管与腺泡细胞比例逐渐接近正常,但是C组腺泡未完全恢复正常。A、B组在导管再通早期,PCNA、P53比正常对照组高表达(P<0.01),并逐步增多,分别于A组再通后第3天、B组再通后第5天达到峰值,随着再通时间延长,腺泡、导管形态逐渐恢复正常,PCNA、P53含量分别于A组再通后第14天、B组再通后第21天逐渐接近正常对照组(P>0.05),C组两者表达均不稳定,且未达到正常值。Tune1荧光检测发现:A、B组凋亡细胞逐渐减少并接近正常值,C组凋亡细胞变化表示腺体无明显恢复迹象。结论:腮腺导管结扎后,在一定时间内实现导管再通腺泡再生可恢复正常。腮腺主导管结扎再通后PCNA、P53的表达与腮腺再生过程密切相关,提示PCNA、P53在腮腺结扎再通后的细胞增殖途径中可能发挥重要作用。
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