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虾青素(Astaxanthin)是一种具有极强着色能力和抗氧化活性的类胡萝卜素,在水产养殖、食品和医药化工行业具有广泛的应用前景。雨生红球藻Haematococcus pluvialis和小球藻Chlorella zofingiensis目前是生物合成虾青素的两种主要微藻来源。本文就两种藻中虾青素生物合成的调控以及两种藻类虾青素在我国南方主要经济海胆品种紫海胆Anthocidaris crassispina养殖中的应用进行了研究。结果表明:
1.紫外线和甲基磺酸乙酯复合诱变、尼古丁筛选是一种有效的雨生红球藻虾青素高产突变株育种方法。利用该方法得到了一个虾青素含量高达出发株1.83倍、生长速率比出发株提高14%、生理生化特性稳定、具有稳定遗传性能的雨生红球藻优良突变株El。
2.小球藻Chlorella zofingiensis细胞生物量和虾青素累积量与培养基、培养条件密切相关。采用优化后的培养基KM1,添加葡萄糖诱导培养小球藻,可以获得8.99g/L的藻细胞干重,虾青素产量和含量分别达到20.1mg/L和2.24mg/g。
3.添加雨生红球藻藻粉、小球藻藻粉以及化学合成虾青素的配合饵料投喂紫海胆Anthocidaris crassispina,其生殖腺中可以积累0.15-3.01mg/g的虾青素。添加雨生红球藻藻粉获得了最大的生殖腺虾青素含量(3.01mg/g)。添加小球藻藻粉组生殖腺虾青素的含量低于添加雨生红球藻藻粉和化学合成虾青素实验组。在添加同种虾青素来源的组内之间,所有添加400mgkg-1虾青素水平的实验组其海胆生殖腺中虾青素的含量都高于添加100mg/kg虾青素水平的实验组(1.7-4.8倍)。不同实验组海胆生殖腺灰份、蛋白、碳水化合物和脂的含量差别不大。添加虾青素有利于海胆的生长。
另外,本文利用C30反相柱建立了能有效分离绿藻中游离虾青素、虾青素单酯和二酯的高压液相色谱方法。