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背景及目的：
NK/T细胞淋巴瘤（Natural Killer T-Cell Lymphoma，NKTCL）是一种起源于成熟的T细胞和NK细胞的非霍奇金淋巴瘤亚型。NKTCL多发于东亚和拉丁美洲，而罕发于欧美国家。目前发病机制仍在研究中，由于其早期临床表现不典型，进展迅速、预后不良，尚缺乏血浆中特异性的分子诊断、疗效预测的生物标志物。环状RNA（circular RNA，circRNA）是5’端和3’端通过反向剪接而形成的共价闭合连续的环状的非编码RNA。CircRNA可以充当竞争性内源RNA，从而调节转录和翻译。同时，因其特殊的环状结构而具有独特的保守性、稳定性、阶段和组织特异性，具有成为生物标志物的潜力。然而，在NKTCL中circRNA的临床意义和生物学机制尚无报道。本文检测了circRNA在NKTCL患者血浆中的表达谱，探讨circRNA在NKTCL中的临床意义，并探索其生物学分子机制。
方法：
1.通过NKTCL患者及健康对照者血浆circRNA芯片微阵列表达谱检测，及小样本qRT-PCR验证，筛选在NKTCL患者和健康对照者血清中显著差异表达的目的circRNA。
2.通过qRT-PCR在NKTCL患者及健康对照者血浆中验证目的circRNA的相对表达量。并结合临床资料进行相关统计学分析。
3.构建shRNA并包装干扰慢病毒，转染NKTCL细胞系，构建体外干扰模型。进行细胞功能实验，CCK-8实验和Annexin V流式凋亡实验。
4.构建裸鼠皮下成瘤模型，测量肿瘤体积和质量，并进行TUNEL检测和免疫组织化学染色。
5.生物信息学预测目的circRNA可以结合的miRNA，并通过双荧光素酶报告实验验证。预测下游蛋白，并通过western blot和免疫组化进行体内外蛋白表达量的测定。
结果：
1.通过6位NKTCL患者和6位健康对照者的血浆circRNA微阵列分析，差异表达（FC值＞1.0）的上调circRNA共有6137个，下调circRNA共有6190个。其中，满足FC值＞2.0并且P＜0.05的circRNA，上调表达有170个，下调表达有188个。通过小样本实验筛选出circADARB1在NKTCL患者血浆中稳定表达且差异显著。
2.CircADARB1在NKTCL患者血浆中的相对表达量明显高于健康对照组，绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算ROC曲线下面积（AUC）为0.742±0.050，且敏感度为0.860，特异度为0.600。临床资料分析中，circADARB1相对表达量与疗效评价有关。
3.CCK-8检测显示敲低circADARB1细胞增殖降低，Annexin V凋亡检测显示敲低circADARB1细胞凋亡增加。
4.裸鼠皮下成瘤实验中，敲低circADARB1后，肿瘤体积明显较小，质量较轻。Ki-67在敲低circADARB1肿瘤组织中呈弱阳性，TUNEL在敲低circADARB1肿瘤组织中呈阳性。
5.生物信息学预测circADARB1可以结合miR-214-3p。双荧光素酶报告实验结果表明circADARB1和miR-214-3p存在相互作用。生物信息学预测miR-214-3p能够调控p-Stat3。敲低circADARB1后，p-Stat3的蛋白表达量降低。在裸鼠肿瘤组织中，p-Stat3在敲低circADARB1肿瘤组织中低表达。
结论：
1．CircADARB1在NKTCL血浆中高表达，是协助诊断及预测疗效的潜在生物标志物。
2．敲低circADARB1抑制体内外NKTCL细胞增殖。
3．CircADARB1结合miR-214-3p，并调控p-Stat3。
NK/T细胞淋巴瘤（Natural Killer T-Cell Lymphoma，NKTCL）是一种起源于成熟的T细胞和NK细胞的非霍奇金淋巴瘤亚型。NKTCL多发于东亚和拉丁美洲，而罕发于欧美国家。目前发病机制仍在研究中，由于其早期临床表现不典型，进展迅速、预后不良，尚缺乏血浆中特异性的分子诊断、疗效预测的生物标志物。环状RNA（circular RNA，circRNA）是5’端和3’端通过反向剪接而形成的共价闭合连续的环状的非编码RNA。CircRNA可以充当竞争性内源RNA，从而调节转录和翻译。同时，因其特殊的环状结构而具有独特的保守性、稳定性、阶段和组织特异性，具有成为生物标志物的潜力。然而，在NKTCL中circRNA的临床意义和生物学机制尚无报道。本文检测了circRNA在NKTCL患者血浆中的表达谱，探讨circRNA在NKTCL中的临床意义，并探索其生物学分子机制。
方法：
1.通过NKTCL患者及健康对照者血浆circRNA芯片微阵列表达谱检测，及小样本qRT-PCR验证，筛选在NKTCL患者和健康对照者血清中显著差异表达的目的circRNA。
2.通过qRT-PCR在NKTCL患者及健康对照者血浆中验证目的circRNA的相对表达量。并结合临床资料进行相关统计学分析。
3.构建shRNA并包装干扰慢病毒，转染NKTCL细胞系，构建体外干扰模型。进行细胞功能实验，CCK-8实验和Annexin V流式凋亡实验。
4.构建裸鼠皮下成瘤模型，测量肿瘤体积和质量，并进行TUNEL检测和免疫组织化学染色。
5.生物信息学预测目的circRNA可以结合的miRNA，并通过双荧光素酶报告实验验证。预测下游蛋白，并通过western blot和免疫组化进行体内外蛋白表达量的测定。
结果：
1.通过6位NKTCL患者和6位健康对照者的血浆circRNA微阵列分析，差异表达（FC值＞1.0）的上调circRNA共有6137个，下调circRNA共有6190个。其中，满足FC值＞2.0并且P＜0.05的circRNA，上调表达有170个，下调表达有188个。通过小样本实验筛选出circADARB1在NKTCL患者血浆中稳定表达且差异显著。
2.CircADARB1在NKTCL患者血浆中的相对表达量明显高于健康对照组，绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算ROC曲线下面积（AUC）为0.742±0.050，且敏感度为0.860，特异度为0.600。临床资料分析中，circADARB1相对表达量与疗效评价有关。
3.CCK-8检测显示敲低circADARB1细胞增殖降低，Annexin V凋亡检测显示敲低circADARB1细胞凋亡增加。
4.裸鼠皮下成瘤实验中，敲低circADARB1后，肿瘤体积明显较小，质量较轻。Ki-67在敲低circADARB1肿瘤组织中呈弱阳性，TUNEL在敲低circADARB1肿瘤组织中呈阳性。
5.生物信息学预测circADARB1可以结合miR-214-3p。双荧光素酶报告实验结果表明circADARB1和miR-214-3p存在相互作用。生物信息学预测miR-214-3p能够调控p-Stat3。敲低circADARB1后，p-Stat3的蛋白表达量降低。在裸鼠肿瘤组织中，p-Stat3在敲低circADARB1肿瘤组织中低表达。
结论：
1．CircADARB1在NKTCL血浆中高表达，是协助诊断及预测疗效的潜在生物标志物。
2．敲低circADARB1抑制体内外NKTCL细胞增殖。
3．CircADARB1结合miR-214-3p，并调控p-Stat3。