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恶性肿瘤的"恶"之所在除增长失控外,主要具有侵袭性和转移性.肿瘤侵袭与转移是肿瘤病人的主要致死因素,90%以上的肿瘤患者最终死于肿瘤转移和复发.因此,寻求一种灵敏、特异的诊断手段,对于转移的早期诊断显得尤为必要.骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)是存在于细胞外基质中的一种高度磷酸化和糖基化的非胶原蛋白,主要表达于胚胎滋养层细胞和骨细胞.近年来,BSP在骨转移瘤中的高表达提示它在肿瘤的微钙化和骨转移中发挥重要作用.然而,肿瘤细胞对骨的"亲和性"机制还不甚清楚,本研究主要对BSP在肿瘤转移中的作用机制进行探讨.侵袭是转移最关键的步骤.本文从增殖、粘附、降解和移动等方面,研究了BSP对乳腺癌细胞MCF-7侵袭和转移潜能的影响.将构建的pCDNA 3.1(-)-BSP和pCDNA 3.1(-)-antiBSP稳定转染MCF-7细胞.RT-PCR确证转染细胞中重组质粒的存在后,细胞生长曲线、软琼脂集落形成、平板集落形成实验及流式细胞术证实了BSP对细胞增殖有一定的促进作用;细胞粘附实验结果显示BSP使MCF-7细胞粘附性增加,并且BSP的高表达使MCF-7细胞中E-cadherin表达下降;酶谱和RT-PCR证实转染了BSP基因的MCF-7细胞中MMP2活性和表达量的升高,亦用酶谱检测了uPA活性的增强;Wound healing assay和Transwell migration assay提供了BSP促进细胞运动能力的依据.结果表明,BSP在一定程度上促进了肿瘤的转移,进一步的证据从动物实验获得.建立合适的动物转移模型是今后研究的方向,pEGFPN1-BSP和pEGFPC1-BSP质粒和MDA-MB-231细胞提供了良好的素材.