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弥漫性掌跖角化病是一组手掌和足趾发生过度角化的常染色体显性遗传病，现有研究认为该疾病与三个基因相关：定位在12q13的角蛋白KRTI基因和KRT16基因以及定位在17q12-q21的KRT9基因。角蛋白是表皮内最主要的结构蛋白。并且在维持角质细胞形态中起到重要作用，该基因缺陷会导致遗传性皮肤病。我们在本室收集的一个常染色体显性弥漫性掌跖角化病家系中检测到KRTI基因的突变IA37P，并对其突变后导致的功能变化进行了初步研究。
第一章对一个常染色体显性弥漫性掌跖角化病家系的候选致病基因进行突变检测
现有研究表明，常染色体显性弥漫性掌跖角化病由KRTI基因、KRTl6基因和KRT9基因的突变所致。我们对本室收集的一个常染色体显性弥漫性掌跖角化病家系进行上述三个侯选基因的突变检测，通过PCR和直接测序，在KRTl基因中发现了一个错义突变T1310C，导致第437位亮氨酸突变为脯氨酸IA37P，该突变与疾病表型共分离，在60个家系外的正常对照中未发现该变异。因此，我们推测KRTl基因的L437P突变可能是导致该家系发生弥漫性掌跖角化病的原因。
第二章 KRTl基因突变体的构建和表达分析
为了探明我们发现的KRTl基因L437P突变与疾病的关系，我们从皮肤cDNA文库中扩增出KRTl野生型cDNA序列，并采用overlap法扩增出T1310C突变的cDNA序列，分别克隆至pEGFP-N1质粒构成重组质粒，转染HaCat细胞后用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的绿色荧光表达，野生型的KRTl的过表达在细胞中呈现出规则的网状结构， L437P突变体的过表达则在细胞中显示出不规则的网状结构和弥漫性的颗粒样聚集。由此我们推测KRTl基因L437P突变扰乱了角蛋白中间丝的正常网状结构，从而导致该家系发生弥漫性掌跖角化病。