【摘 要】
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为了探讨血塞通对家兔脑缺血再灌注后脑部NOS(包括cNOS和iNOS)活性的影响及对nNOS阳性神经元的保护作用,本实验以肌肉注射的途径给予脑缺血再灌注的家兔血塞通注射液,对缺血
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为了探讨血塞通对家兔脑缺血再灌注后脑部NOS(包括cNOS和iNOS)活性的影响及对nNOS阳性神经元的保护作用,本实验以肌肉注射的途径给予脑缺血再灌注的家兔血塞通注射液,对缺血再灌注不同时间段的家兔大脑皮质顶叶、额叶、海马、小脑和延髓的NOS活性的变化和脑缺血再灌注后大脑和小脑nNOS阳性神经元的保护作用进行了系统研究。试验一利用生物化学检测技术,采用NOS测定试剂盒,检测脑缺血再灌注各时间段家兔大脑皮质顶叶、额叶、海马、小脑和延髓内NOS的活性变化。结果表明:大脑皮质顶叶、额叶、海马、小脑和延髓内cNOS(主要是nNOS)活性在缺血再灌注2h后开始升高,6h左右达高锋,以后逐渐下降,24h、48h和72h后活性持续降低,最后保持在正常水平左右;而iNOS的活性在脑缺血再灌注各时间段持续升高,72h达峰值,且iNOS活性明显高于正常对照组(P<0.05)。结果提示,由nNOS产生的NO主要在脑缺血损伤的早期(6h左右)发挥作用,而由iNOS产生的NO主要在脑缺血损伤的晚期发挥作用。血塞通注射液对家兔急性脑缺血再灌流2h的保护作用不明显(P>0.05);缺血再灌注6h后,直至72h,血塞通治疗组较相应缺血再灌注未治疗组NOS活性明显下降(P<0.05),最后接近于正常水平。结果表明:血塞通在脑缺血再灌注损伤中发挥重要的保护作用。试验二利用SABC免疫组织化学方法,检测血塞通对脑缺血再灌注各时间段家兔大脑皮质、海马和小脑皮质nNOS免疫阳性神经元的保护作用。结果表明:大脑皮质、海马和小脑皮质nNOS免疫阳性神经元随着缺血再灌注时间的不同,神经元数量、胞体截面积、最长突起长度都有所变化。缺血再灌注2h、6h两组,上述各部nNOS阳性神经元数量、胞体截面积、最长突起长度并未见明显变化,细胞排列整齐,细胞膜清晰,细胞的形态结构变化不大,与正常对照组相比,差异不显著(P>0.05);缺血再灌注24h、48h、72h三组上述部位的阳性神经元变化明显,细胞着色加深,体积缩小,梗死灶内神经细胞坏死缺失严重,最长突起长度明显变短,细胞明显减少,差异显著(P<0.05)。血塞通治疗2h组保护作用不明显,脑组织未出现明显改变,在大脑皮质额叶及海马等处可见神经元数量、胞体截面积、最长突起长度与缺血未治疗组相比变化不大,差异不显著(P>0.05);血塞通治疗6h、24h、48h和72h组家兔脑组织,阳性神经元的数量、胞体截面积及最长突起长度变化显著,神经元细胞核固缩、核溶解等缺血变化与相应的缺血再灌注组未治疗相比明显减轻,只有少数神经细胞出现死亡。血塞通可明显减少死亡神经元的数量,并使神经元的最长突起长度有所增加,治疗效果显著(P<0.05)。实验结果表明:血塞通在脑缺血再灌注损伤中发挥重要的保护作用。
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