MicroRNA-142-3p负调控经典的Wnt/β-catenin信号通路

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Wnt/β-catenin信号通路是进化上保守的,在多种生物的胚胎发育及其成体组织器官发育过程中起着重要作用的信号通路。Wnt/β-catenin信号通路的过度活化与机体的发育异常及很多癌症的发生发展有关,因此对Wnt/β-catenin信号通路的调控研究吸引了越来越多研究者的关注。科研工作者对于Wnt/β-catenin信号通路中蛋白的组成和相互作用以及信号转导途径已经有了较深入的了解,但是对该通路的微调控的研究还不充分。  MicroRNA是长21-23个核苷酸的单链小RNA分子,通过结合mRNA的3UTR抑制蛋白的翻译,起着微调控基因表达的作用。MicroRNA的发现揭开了复杂基因调控网络的一个新的层面,随着对microRNA功能研究的深入,发现microRNA的作用十分广泛,几乎影响细胞代谢的方方面面。MicroRNA的功能对机体是至关重要的,特异地阻断microRNA的生物生成途径会造成机体一系列的病理变化。  有研究表明Wnt/β-catenin信号通路能被microRNA调控。因此,本论文以microRNA分子对Wnt/β-catenin信号通路的调控为研究对象,探究能对Wnt/β-catenin信号通路起调控作用的microRNA。我们运用双荧光报告系统筛选能影响Wnt/β-catenin信号通路活性的microRNA,发现miR-142能抑制Wnt/β-catenin信号通路。但有报道称miR-142-3p靶标APC(Adenomatous Polyposis Coli)来上调Wnt/β-catenin信号通路。鉴于这个不同的发现,我们构建了多种miR-142的突变质粒。对这些突变质粒的研究表明pre-miR-142的序列和结构对负调控Wnt/β-catenin信号通路是必不可少的。我们还发现是miR-142-3p,而不是miR-142-5p,抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性。miR-142-3p通过直接靶标β-catenin的3UTR来抑制β-catenin的蛋白翻译。而且,表达miR-142的细胞增殖受到抑制。我们的结果证明了miR-142-3p是一个新的Wnt/β-catenin信号通路的抑制分子,为治疗Wnt/β-catenin信号通路异常引起的癌症提供了新的机遇。
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