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次氯酸是生物体内一种对人类免疫功能系统至关重要的活性氧物种,有助于破坏入侵细菌和病原体。然而,一旦生物体内次氯酸浓度异常,就会引起氧化或还原应激,进而导致多种疾病的发生。一氧化氮是生物体内一种还原性自由基,具有脂溶性,可快速透过生物膜扩散,是目前所知的最强的血管舒张因子,能参与生物体内许多生理和病理过程。鉴于次氯酸和一氧化氮在生物学上的重要性,监测二者浓度的变化,研究其在活细胞中的动态分布,已成为当今细胞生物学和医疗诊断等领域的研究热点。虽然检测次氯酸和一氧化氮的方法有很多种,但是荧光探针分子因同时具备灵敏度高、响应速度快、选择性好、细胞毒性小、生物相容性好、可与激光共聚焦显微成像技术结合对生物体内活性分子进行原位、实时监测等多种优势而成为检测它们的有效方法且发展迅速。 本论文主要研究内容为: (1)以罗丹明B为荧光探针分子对次氯酸进行高选择性检测,并成功应用于肝癌细胞内对外源性次氯酸进行荧光成像。利用高效液相色谱-质谱联用和核磁共振等技术手段对罗丹明B和次氯酸的相互作用机理进行了研究。研究发现:罗丹明B与次氯酸作用后并不形成螺环化合物,而是次氯酸中的氯原子取代了罗丹明B氧杂蒽片段上的氢生成了氯代罗丹明B,其荧光量子产率相较于罗丹明B明显降低,并且氯代罗丹明B的荧光量子产率随着取代氯原子数的增多而下降。 (2)设计合成了两个以罗丹明B为荧光团,醯腙为识别基团的荧光探针分子RhB-HD-En和RhB-HD-Im,并对其结构进行了表征,期望对次氯酸进行检测。 (3)在第三章工作的基础上,进一步将顺磁性的二价铜离子(Cu2+)引入探针分子RhB-HD-En和RhB-HD-Im形成两个新的探针分子RhB-HD-En-CuⅡ和RhB-HD-Im-CuⅡ,并对其结构进行了表征,期望对一氧化氮进行检测。