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目的：1、采用严重烫伤小鼠模型，动态观察烫伤后脾脏树突状细胞亚群(DC)分化及炎症因子释放的变化。2、通过CD11clowCD45RBhigh树突状细胞(CD11clowCD45RBhigh DCs)体内回输，阐明CD11clowCD45RBhigh DCs对烫伤所致的失控性全身炎症反应及早期死亡率的影响。
方法：采用重度烫伤动物模型。雄性清洁级BABLB/c小鼠，体重19—21g，浸于(99±0.5)℃沸水中8s，造成15％体表面积Ⅲ度烫伤。烫伤后即刻从腹腔给予林格液(1ml/只)抗休克治疗。实验分组：174只小鼠随机分为9组，(1)正常对照组(n=7)：麻醉后活杀。(2)假烫伤组(n=21)：在假烫伤后即刻给予林格液(1ml/只)。(3)烫伤组(n=26)：在烫伤后即刻给予林格液(1ml/只)抗休克治疗。(4) DCs(105)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCs(105/ml)的林格液(1ml/只)治疗。(5) DCs(5×105)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCs(5×105/ml)的林格液(1ml/只)治疗。(6) DCs(106)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCs(106/ml)的林格液(1ml/只)治疗。(7)DCregs(105)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCregs(105/ml)的林格液(1ml/只)治疗。(8) DCregs(5×105)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCregs(5×105/ml)的林格液(1ml/只)治疗。(9) DCregs(106)回输组(n=20)：于烫伤后即刻给予加入在小鼠脾脏分离纯化得到的DCregs(106/ml)的林格氏液(1ml/只)治疗。分别于烫伤后12、24、48小时无菌取血、腹腔液和脾脏。分离血清及腹腔液，—70℃贮存。脾脏用于提取DC细胞。DC的分离纯化采用MiniMACS免疫磁性分离系统进行。其他的35只小鼠用于观察死亡率。采用流式细胞术检测细胞免疫表型和细胞表面受体及炎症因子。
结果：(1)小鼠脾脏树突状细胞标染别藻蓝蛋白(APC)抗小鼠CD11c单克隆抗体及藻红蛋白(PE)抗小鼠CD45RB单克隆抗体后在流式细胞仪上检测。流式图中显示3种不同的DCs亚群，分别是CD11clowCD45RBhigh，CD11chighCD45RBint+low和CD11clowCD45RBlowDCs(low为低表达、high为高表达)。(2) CD11chighCD45RBint+lowDCs在烫伤后0-12小时明显升高，CD11clowCD45RBhigh DCs在烫伤后24—48小时明显升高，CD11clowCD45RBlow DCs则在烫伤后48—120小时升高。(3)通过CBA检测血浆及腹腔液中细胞因子的含量，IL—6、MCP—1、TNF-α的峰值出现在烫伤后12—24小时，而IL-10的峰值出现在烫伤后48小时。(4)单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhigh DCs和单纯腹腔注射DCs与烫伤组小鼠比较，在烫伤后0-48小时可明显降低血浆中IL—6、MCP—1、TNF-α的水平，单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhigh DCs与单纯腹腔注射DCs比较，在烫伤后0-48小时可轻度降低血浆中IL—6、MCP—1、TNF-α的水平，而单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhigh DCs与单纯腹腔注射DCs和烫伤组小鼠比较，在烫伤后24—48小时IL-10水平明显升高。(5)单纯腹腔注射DCs可轻度降低烫伤小鼠死亡率，单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhigh DCs与单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhigh DCs和单纯腹腔注射DCs比较，可显著降低烫伤小鼠死亡率，并呈现剂量依赖效应。
结论：1.烫伤能诱导脾脏中以分泌IL-10为主的CD11clowCD45RBhighDCs产生。2.在烫伤后单纯腹腔注射CD11clowCD45RBhighDCs即能有效控制局部及全身炎症因子的释放，从而降低烫伤小鼠早期死亡率。3.CD11clowCD45RBhighDCs可能是体内调控全身炎症反应的关键因素。