【摘 要】
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新疆是我国最大的产棉区,但是地处内陆地区,常年的干旱少雨气候,严重制约了新疆棉花的生长。因此,深入研究棉花的抗旱机理,探求棉花抗旱本质,从而选育出高抗旱的棉花品种是新
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新疆是我国最大的产棉区,但是地处内陆地区,常年的干旱少雨气候,严重制约了新疆棉花的生长。因此,深入研究棉花的抗旱机理,探求棉花抗旱本质,从而选育出高抗旱的棉花品种是新疆棉花生产中急需解决的问题。传统的抗旱性研究多集中在核酸水平,很难从根本上揭示棉花的抗旱机制。众所周知,蛋白质才是生命活动的执行者,直接体现各种生命现象。所以,研究干旱胁迫下棉花蛋白质水平的差异性,并结合质谱技术和生物信息学知识,对理解棉花抗旱机理,进而指导棉花抗旱育种具有极其重要的意义。本论文以PEG胁迫处理的苗期棉花为材料,利用双向电泳技术,研究不同处理条件下棉花叶片蛋白质组的表达差异。将差异明显的蛋白点进行切割,然后进行肽指纹图谱鉴定和数据库比对,结合生物信息学知识分析这些差异蛋白与棉花抗旱性的内在联系。本研究在蛋白质水平上探求了棉花的抗旱机理,以期为棉花的抗逆研究和培育高抗旱的棉花新品种提供帮助。本论文研究结果如下：1.比较酚法、TCA/丙酮法以及改良的TCA/丙酮法,得出改良的TCA/丙酮法最适合棉花叶片总蛋白质的提取。2.当裂解缓冲液中含有7mol/L尿素、2mol/L硫脲、4%CHAPS、80mmol/LDTT、1mmol/L PMSF、0.3%载体两性电解质时,蛋白质样品得到了很好的溶解。硝酸银染色法适用于分析胶的制备,而考马斯亮蓝法制备的胶与质谱兼容性较好。当选用24cm,pH4-7的IPG胶条,上样量为600μg时,得到了质量较高的双向电泳图谱。3.将差异明显的113个蛋白点进行MALDI-TOF-TOF/MS分析,最终有102个蛋白点得到成功鉴定。对它们进行功能分析表明：它们主要参与到碳水化合物代谢、光合作用、细胞防御、氨基酸和蛋白质合成、细胞加工、分子伴侣等过程。
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