维生素C缓解肉鸡腹水综合征的机理研究

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本文通过体内外试验研究了维生素C(VC)对肉鸡及其缺氧平滑肌细胞缺氧诱导因子-1 α (Hypoxia inducible factor-1 α, HIF-1 α)基因表达的影响,揭示VC缓解肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)的分子机制。本论文包括两个试验。试验1:VC调控肉鸡缺氧肺动脉血管平滑肌细胞HIF-1α基因表达的分子机制本试验旨在体外培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMC)的基础上利用氯化钻(CoCl2)建立细胞缺氧模型,探讨VC、脯氨酸羟化酶抑制剂(DMOG)和过氧化氢(Hydrogenperoxide,H2O2)调控肉鸡缺氧PASMC氧化还原状态与HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(VEGFR2)的基因表达。结果表明,VC(500μmol/L)显著增加细胞SOD/MDA的比值(P<0.05),下调HIF-1α/VEGF/VEGFR2 mRNA的表达水平(P<0.05);H2O2显著上调细胞HIF-1α mRNA表达(P<0.05),VC具有缓解(P<0.05)H2O2导致的细胞氧化应激和HIF-1α mRNA表达上调的作用;DMOG显著上调SOD/MDA的比值(P<0.05),显著下调HIF-1α和VEGFR2 mRNA表达(P<0.05),显著上调VEGF mRNA的表达(P<0.05);VC协同DMOG显著上调HIF-1α/VEGF/VEGFR2 mRNA表达(P<0.05);VC/H2O2/DMOG三者同时添加极显著增加HIF-1α/VEGF/VEGFR2 mRNA表达(P<0.01)。以上结果提示,VC可通过提升细胞外基质的抗氧化水平和脯氨酸羟化酶的活性来调控缺氧基因的表达。试验2:VC对低温诱导和腹腔注射DMOG肉鸡腹水综合征发生的影响试验采用2×2×2因子完全随机试验设计,2个温度水平(常温和低温),2个DMOG注射水平(0和40mg/kg BW),2个VC水平(0和1000mg/kg饲粮),共计8个处理,每个处理6个重复,共48只1日龄AA肉公鸡。试验期为1-14d。常温饲养组第1-7d温度为29℃-31℃,第8-21d为24℃-26℃;低温饲养组第1-7d温度为24℃-26℃,第8-14d为9℃-11℃。结果表明:低温和DMOG注射显著降低肉鸡8-14d和1-14dADG(P<0.05),提高ADFI(P<0.05),降低肉鸡饲料转化率;添加VC能显著(P<0.05)缓解低温和DMOG对肉鸡生产性能的负面效应;低温和DMOG均显著增加14d肉鸡心脏指数(HI)(P<0.05),且VC能显著降低低温诱导下肉鸡的心脏指数(右心室重/(左心室+膈))(P<0.05);DMOG显著增加肉鸡血管中膜面积与总管面积的比值Vessel wall area to Vessel total area, WA/TA,%)和肺动脉平均中膜厚度占血管外径的比值(Mean media thickness in pulmonary arterioles, mMTPA,%) (P<0.05);添加VC能显著降低低温条件下肉鸡WA/TA和mMTPA (P<0.05),表现出显著的交互效应(P<0.05);低温和DMOG显著降低14d肉鸡肺脏PPARy和PHD的表达量(P<0.05);低温显著增加14d肉鸡肺脏细胞凋亡(P<0.05),VC则能显著降低肉鸡肺脏细胞凋亡(P<0.05);常温条件下,VC和DMOG显著增加肉鸡肺脏细胞凋亡(P<0.05)。以上结果提示:添加VC能缓解低温与DMOG注射诱导肉鸡AS的发生。
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