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我国是动物源细菌耐药性最严重的国家之一,耐药性在动物、环境和人群间的扩散和传播已成为人们关注的热点问题。沙门氏菌是重要的食源性人兽共患病原菌,其耐药性的扩散和传播对人类健康和公共卫生具有重要影响。
本研究从养殖场和散养的动物(鸡、猪、鸭等)中分离鉴定了51株沙门氏菌,采用琼脂稀释法测定临床分离沙门氏菌对17种抗菌药物的敏感性,结果表明51株临床分离沙门氏菌对链霉素的耐药率最高,为54.9％,其次是多西霉素,耐药率为33.3％,对卡那霉素、庆大霉素、壮观霉素、氨苄西林、氯霉素、氟苯尼考、四环素、恩诺沙星、环丙沙星的耐药率在20％～30％之间。对头孢菌素类最敏感,敏感率超过90％,此外有7株(13.7％)沙门氏菌对动物促生长剂喹乙醇、乙酰甲喹耐药。51株临床分离沙门氏菌中,有13株(25.5％)表现为多重耐药,有2株对所测定的6类17种抗生素全部耐药,10株对5类抗生素耐药,只有一株对3类抗生素耐药。主要耐药谱型是β-内酰胺类/氨基糖苷类/氯霉素类/四环素类/氟喹诺酮类。
采用PCR方法检测51株沙门氏菌中的整合子和多药外排泵OqxAB的流行分布。PCR扩增结果显示,12株(23.5％)沙门氏菌中检测到1类整合子。51株沙门氏菌中没有检测到intI2和intI3基因。多药外排泵OqxAB是第一个被鉴定出来的介导对动物促生长剂喹乙醇耐药的多药外排泵。本研究从51株沙门氏菌中检测到有8株携带oqxA、oqxB基因,并且对应的喹乙醇的MIC值均≥641μg/mL,,对应的乙酰甲喹的MIC值均≥32μg/mL。有12株沙门氏菌携带1类整合子,结合51株临床分离沙门氏菌耐药表型发现,沙门氏菌多重耐药性与1类整合子的检出呈正相关。
以12株整合子阳性沙门氏菌和8株oqxAB阳性沙门氏菌为供体菌,大肠杆菌J53AziR为受体菌,进行质粒接合转移实验。结果分别获得8株整合子阳性接合子和4株oqxAB阳性接合子。对所有8株整合子阳性接合子敏感性测定结果显示,全部整合子阳性接合子氨基糖苷类、β-内酰胺类、氯霉素类药物的MIC值与对应的供体菌相似。有部分整合子阳性接合子对氟喹诺酮类药物、四环素类药物、喹恶啉类药物较敏感,这些药物的MIC值与受体菌大肠杆菌J53AziR相似,但所对应的供体菌却对这些药物表现耐药,说明部分沙门氏菌整合子阳性株的这些药物耐药决定子没有随接合质粒和整合子一起进行转移大肠杆菌J53AziR中。
对所有4株oqxAB阳性接合子敏感性测定结果显示,全部4株oqxAB阳性接合子喹恶啉类药物、氨基糖苷类药物、氯霉素类药物的MIC值较高且与对应的供体菌相似,说明介导这些药物耐药的决定子可能随同一接合质粒和oqxAB基因一起进行转移,也提示多药外排泵OqxAB除介导对喹恶啉类药物的耐药性外,还可能与氨基糖苷类药物、氯霉素类药物的耐药性有联系。有部分oqxAB阳性接合子对氟喹诺酮类药物、β-内酰胺类药物和四环素类药物较敏感,这些药物的MIC值与受体菌大肠杆菌J53AziR相似,但所对应的供体菌却对这些药物表现耐药,说明部分沙门氏菌oqxAB阳性株的这些药物耐药的决定子没有随接合质粒和oqxAB基因一起进行转移到大肠杆菌J53AziR中,也说明oqxAB基因与氟喹诺酮类、β-内酰胺类和四环素类药物的耐药性没有必然联系。
本研究在动物源沙门氏菌中检测到1类整合子,并且还检测出多药外排泵OqxAB编码基因oqxAB:结合MIC测定结果,证明1类整合子和沙门氏菌的多重耐药表型密切相关,质粒接合转移实验表明,oqxAB可存在于沙门氏菌质粒上,并可随质粒从沙门氏菌传递到大肠杆菌。多药外排泵OqxAB可介导沙门氏菌对喹乙醇、乙酰甲喹耐药,也可能同时与氨基糖苷类、氯霉素类药物耐药性有联系,但与氟喹诺酮类药物、β-内酰胺类药物和四环素类药物的耐药性没有必然联系。