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背景： 银屑病是一种由多基因遗传决定的、多环境因素刺激诱导的免疫异常性慢性炎症性增生性皮肤病。银屑病病程较长、反复发作、较难治愈，严重影响患者的身体和精神健康。现今对银屑病的病因仍然未知。对银屑病发病机制的研究理论为银屑病患者具银屑病易感基因，这些基因位点主要是组织相容性白细胞抗原Ⅰ类和Ⅱ类(histocompatibilityleukocyteantigen，HLA-Ⅰ，Ⅱ)，具体包括HLA-B13，-B17，-B39，-B57，-Cw6，-Cw7，-DR4，和-DR7[3]。在基因遗传特质基础上，受一定的环境因素或抗原诱导如机械损伤，紫外线，化学损伤，各种感染，药物因素，心理打击，抽烟和其他因素等致发病。抗原呈递细胞或自身免疫介导激活T淋巴细胞，细胞因子亦影响T淋巴细胞活性，活化的T淋巴细胞分泌多种细胞因子致KC过度增殖和异常分化。反过来，KC也分泌细胞因子作用于自身、T淋巴细胞、抗原呈递细胞等形成银屑病发病发展中复杂的网络化调控的过程。T淋巴细胞和KC在丰富的细胞因子中相互激活这一特征性机制导致银屑病不断发生发展过程。 银屑病发病的主要原因是KC缺陷？还是T细胞缺陷？这一问题的争议已经持续了近20年。银屑病经典药物卡泊三醇和维甲酸类药物的作用机制是调节KC分化，并没有对T细胞的作用。同形反应也不能用T细胞发病机制来解释。CD4T细胞减少的AIDS患者经常罹患银屑病。以上证据及其他多个实验研究均支持KC在银屑病发病中的初始作用。 银屑病非皮损部位的KC建立了3-5条通道分泌数量异常的IFN-γ和亚硝酸盐。银屑病非皮损部位的KC在细胞因子刺激下还能激活亚细胞水平的转录因子活化。据此我们推论银屑病KC内一定存在着某些信号传导系统的异常使得KC在遭受内源性和外源性诱因后发生一系列过度炎症反应，致银屑病不断发生发展。对于银屑病KC信号传导通路的研究，目前提示有三种转录因子调控的缺失:信号传导蛋白和转录激活物1α(signaltransducerandactivatoroftranscription,STAT-1α)，干扰素调节因子-1（interferonregulatedfactor-1，IRF-1），原癌蛋白核转录因子kB(NFκB)。 PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen)是一个重要的抑癌基因，其通过失活PI3K/Akt信号传导通道抑制细胞增殖而发挥抑癌作用。在人类众多肿瘤中PTEN突变、缺失或功能减退。我们早期研究发现银屑病皮损中PI3K亚单位P110(PI3K-P110)特异性高表达，磷酸化Akt的蛋白水平与Akt的激酶活性明显升高。然而，银屑病中PTEN的表达以及PTEN与PI3K/Akt信号通路之间的关系目前未见报道。 本研究在分析银屑病角质形成细胞信号传导途径的基础上，综合运用分子生物学和组织病理学等方法，初步探讨PTEN与银屑病KC增殖的关系，与银屑病皮损PI3K/Akt信号传导通路活化的关系及其在发病中可能的意义，PTEN在炎症增生性疾病与皮肤恶性肿瘤中的作用机制，以期揭示银屑病发生发展的机制，为治疗银屑病提供新的思路和新的靶向。 方法： 1.病例标本的收集 19例寻常型进行期银屑病患者来自2007年至2010年中日友好医院皮肤科门诊及住院确诊患者，正常对照选择与银屑病患者性别、年龄相匹配的中日友好医院整形外科患者正常皮瓣18例。所有病例均需符合以下条件:近2月无系统应用免疫抑制剂、糖皮质激素及维甲酸类药物治疗史，近2月无UVB或PUVA光照史，近2周无外用药物史;无内科疾病，血尿便常规、肝肾功能及其它生化指标均在正常范围。 银屑病患者按常规皮肤手术活检取典型皮损，对照组皮肤均来自整形外科手术切除的多余正常皮肤。皮肤组织取一半立即置于液氮中速冻，之后再移至-80℃冰箱保存备用。另一半置于10％的甲醛溶液，常规石蜡包埋。 中日友好医院皮肤科HE病理诊断慢性皮炎、脂溢性角化、基底细胞癌、鳞状细胞癌各10例患者的蜡块，准备做免疫组化染色。 2.实时定量RT-PCR法检测 从皮肤组织提取总RNA，经逆转录反应(RT)得到cDNA，以管家基因β-actin作为参照，通过实时定量RTPCR技术分别检测各组皮损PTENmRNA的表达。 3.免疫印迹检测 取皮肤组织，提取总蛋白，经过SDS一聚丙烯酞胺凝胶电泳((SDS-PAGE)分离、转膜、蛋白印记、显色等步骤，分别检测各组PTEN的蛋白表达。 4.免疫组织化学法检测 取皮肤组织切片，免疫组织化学法分别检测各组PTEN的蛋白表达。 结果： 银屑病组和正常对照组PTENmRNA的相对表达量分别为0.516547、4.624505，T=2.684，p＜0.01;Westernblot显示银屑病各个条带与对照组各条带相比，其灰度值平均值分别为0.743±0.111，1.061±0.210;T=2.994，p＜0.05;免疫组化染色示PTEN定位于正常皮损和银屑病皮损表皮角质细胞的细胞核及胞浆内，银屑病组与正常组表皮PTEN表达的平均光密度值分别为0.659±0.120，0.078±0.052，T=-18.946，P＜0.01。以上实验均一致证明与正常皮损相比，PTEN蛋白在银屑病皮损中过低表达。 免疫组织化学技术显示慢性皮炎、脂溢性角化、皮肤基底细胞癌、皮肤鳞状细胞癌表皮PTEN表达的平均光密度分别为0.710±0.172，0.693±0.053，0.705±0.164，0.037±0.134;与正常皮损相比，慢性皮炎、脂溢性角化和皮肤基底细胞癌PTEN表达略多，但无统计学差异。皮肤鳞状细胞癌PTEN表达明显比正常皮肤减少，也低于银屑病皮损PTEN表达，与正常皮损和银屑病皮损相比，均具统计学差异。 结论： 免疫组化染色显示PTEN呈棕色颗粒，在表皮各层细胞的胞浆和细胞核内均含有PTEN。运用qRT-PCR、Westernblot、免疫组化等技术证实与正常皮肤、各种良恶性增殖性皮肤病相比，银屑病皮损中PTEN过低表达。银屑病中PTEN过低表达致银屑病PI3K/Akt信号传导通路异常活化，引起角质形成细胞过度增殖和异常凋亡，参与银屑病发病。