论文部分内容阅读
飞天蜈蚣七为五加科楤木属植物楤木的根皮,主要来自于中国秦岭山脉主峰太白山,是“太白七药”之一,常用于治疗风湿性关节炎、肝炎、肾炎、跌打损伤,其中含有包括皂苷、黄酮、多糖等多种药用活性成分。本文以飞天蜈蚣七为研究对象,重点对其多糖成分的提取和分离纯化工艺、理化性质检测、结构解析进行研究,并初步探索了其体外抗氧化活性。主要研究结果如下：(1)通过对热水提取工艺的系统研究,得到一条飞天蜈蚣七多糖提取工艺路线：液料比为10mL/g,提取温度95℃,提取时间1.9h,提取次数2次,多糖提取率为3.16%。(2)通过Sevage法、酶-Sevage法、盐酸法、三氯乙酸法等脱除蛋白方法的对比研究,结果表明酶-Sevage法是一种理想的脱蛋白方法,其优化工艺参数如下：pH值8,酶用量2.7%,酶解温度54℃,酶解时间2h,再经Sevage法除去游离蛋白,蛋白脱除率可达92.68%,多糖保留率为86.91%。(3)通过对活性炭法、反胶束溶液法、双氧水法、大孔树脂法等4种脱色方法的对比研究,结果表明大孔树脂法对飞天蜈蚣七多糖的脱色效果最理想；通过对10种脱色树脂进行筛选,LSA-700B表现出理想的脱色效果,优化工艺条件为：上柱流速2BV/h,上样量1.6BV,上样浓度4mg/mL,温度30℃,其脱色率为94.62%,多糖保留率为92.56%。(4)通过透析、DEAE Cellulose-52纤维素柱层析及Sephadex G-100柱层析分离,得到飞天蜈蚣七纯化多糖(APS-3),并经紫外光谱及高效凝胶渗透色谱检测为其均一多糖,不含核酸、蛋白质、色素等杂质。(5)通过利用X-射线衍射仪、扫描电镜、尺寸排阻色谱-光散射仪、气质联用色谱、红外光谱等多种分析手段对APS-3进行理化性质及结构分析,证明其为非晶态结构,在稀分散溶液下呈束状聚集态形式,且含C、H、O、N四种元素,分子量为128×106g/mol。经结构分析得知,APS-3是一种以(1→4)Gal为主链且含少量非均匀分布的鼠李糖、阿拉伯糖为分支的水溶性多糖,摩尔比为Rha:Ara:Gal=1.01:3.94:6.16.(6)经试验研究表明,飞天蜈蚣七多糖对DPPH、超氧阴离子(O2)均有一定程度的清除作用,具有较强的体外抗氧化活性,且随多糖纯度、浓度的提高,其对自由基的清除能力也越高；其清除DPPH自由基能力高于清除超氧阴离子(O2)能力,均可达到和Vc同样的清除效果,因此可在天然抗氧化药物及功能性食品领域进行深入研究开发。