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本文为了降低Aβ疫苗的毒性同时降低大规模生产Aβ疫苗的成本,在设计上减少了T细胞的抗原决定簇,保留了B细胞的抗原决定簇,去除Aβ的毒性片段,用基因工程的方法制备四价Aβ亚单位疫苗,研究其引起体液免疫的效果。
本文通过基因合成和PCR扩增技术,得到多个甘氨酸连接的Aβ1-15二价B细胞抗原表位基因片段;再用GSGGSGlinker串联这两段Aβ1-15二价基因片段,命名为4×Aβ15,克隆入pcDNA3.1表达载体,构建成功了pcDNA3.1-s4×Aβ15真核表达质粒。
本文成功构建了原核表达载体pGEX-4×Aβ15,并成功表达出可溶的GST融合4×Aβ15蛋白,证实了基因工程原核表达的四价亚单位疫苗的生物学活性,为下一步选择合适的表达载体,生产出具有更低成本更低毒性的Aβ疫苗奠定了科学的实践基础。