HEK293细胞G0期与G1期差异蛋白质组研究

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本文采用了同位素硫35标记的蛋氨酸/半胱氨酸对不同时期进行脉冲代谢标记,继而采用双向凝胶电泳分离蛋白制成干胶曝光后得到各个时期新合成的蛋白组图谱。首先我们建立了合适的双向电泳上样量和35S标记用量及适当的曝光时间等一系列重要条件可以得到高分辨率的图谱,在我们的图谱中含有大量的蛋白合成动态变化信息。通过双向电泳软件分析得到表达量差异两倍以上明显的差异蛋白点45个,这些点用MALDI-TOF质谱鉴定得到22个确定身份的蛋白在G0→G1表达上调,3个下调。其中调节蛋白包括细胞物质与能量代谢相关酶,DNA合成相关酶或转录因子,信号转导相关蛋白,细胞周期调控因子及骨架调节蛋白等。这些结果为我们深入认识G0,G1期提供了十分有用的线索,并显示出G0→G1存在复杂的调控机制。   
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