亮氨酸脑啡肽对栉孔扇贝的免疫调节作用

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贝类神经系统结构简单,中枢神经也比较分散,缺乏专门的内分泌器官,神经系统也具有内分泌作用;贝类无淋巴细胞而无特异性免疫,主要依赖血细胞吞噬、水解酶、氧化酶、活性氧等介导的非特异性免疫抵御病原生物;此外,贝类体内有脑啡肽、IL-1(interleukin-1)、IL-2(interleukin-2)、IL-6(interleukin-6)、TNF(tumornecrosisfactor)等活性肽和细胞因子,对其免疫防御起着重要的调节作用。本实验采用免疫组织化学定位的方法在栉孔扇贝(Chlamysfarreri)的脑神经节、足神经节、脏神经节、嗅检神经节、肠、直肠、肝脏、口唇、唇瓣、肾脏和血细胞检测到亮氨酸脑啡肽(leucine-enkephalin,L-ENK)分子,在栉孔扇贝的脑神经节、足神经节、脏神经节、嗅检神经节、肠、直肠、胃、肝脏、口唇、唇瓣、肾脏、鳃、外套膜、生殖腺和血细胞检测到δ受体、μ受体和κ受体;L-ENK和δ、μ、κ受体在栉孔扇贝体内的广泛分布,表明L-ENK可能参与了扇贝免疫、消化、呼吸、排泄等功能的调节。另外,采用生化测定的方法研究了不同浓度的L-ENK对栉孔扇贝血淋巴中多种自由基的影响,以及不同浓度的L-ENK对栉孔扇贝血细胞吞噬、包囊、聚集和附贴能力的影响,结果表明:(1)栉孔扇贝血淋巴中过氧化氢酶(catalase,CAT)活性随L-ENK浓度的升高而升高,而血细胞中的过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)含量随CAT活性的升高而降低。(2)L-ENK对栉孔扇贝血清结构型一氧化氮合酶(constitutiveNOS,cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducibleNOS,iNOS)活力起抑制作用,对血细胞cNOS和iNOS活力起诱导作用,不同浓度的L-ENK对血淋巴一氧化氮(nitricoxide,NO)含量、cNOS和iNOS活力的影响不同,L-ENK浓度过高和过低时,均不能最有效地诱导血淋巴中的cNOS和iNOS活力。低浓度和中浓度的L-ENK可使血清中的NO含量增加,而对血细胞NO含量没有影响。(3)L-ENK对不依赖卤素的血清髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力起促进效应;低浓度的L-ENK对血细胞MPO活力有抑制作用,较高浓度的L-ENK对血细胞MPO活力有促进作用。(4)L-ENK可使扇贝血清和血细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量显著升高,增强血清和血细胞的抗氧化能力。(5)L-ENK对栉孔扇贝血淋巴酸性α-醋酸萘酯酶(α-NaphthyAcetateEsterase,ANAE)活力有较强的促进作用。(6)血细胞的吞噬能力随L-ENK浓度的升高而升高;不同浓度L-ENK对血细胞包囊化能力的影响不同,中浓度的L-ENK对血细胞的包囊化能力起抑制作用,高浓度的L-ENK对血细胞的包囊化能力起促进作用(7)低浓度的L-ENK对血细胞聚集起抑制作用,较高浓度的L-ENK对血细胞聚集没有影响;而低浓度的L-ENK对血细胞附贴没有影响,较高浓度的L-ENK可抑制血细胞的附贴。总之,L-ENK对栉孔扇贝起着重要的免疫调节作用,其作用机制可能是通过与血细胞表面的受结合而起作用的。
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