菩提树炭疽病的病原种类鉴定以及防治研究

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菩提树是重要的园林树种,菩提树炭疽病是菩提树的重要病害。本试验开展了菩提树炭疽病的病原鉴定、病原生物学特性测定、杀菌剂和生防剂室内筛选及田间化学防治试验,为菩提树炭疽病的防治打下基础,主要研究结果如下:1.通过形态与多基因分子系统学分析确定菩提树炭疽菌的种类菩提树炭疽病的症状特征为初期在叶片上形成褐色圆形病斑,扩大后外圈有褐色或黑色的边缘,交界处的叶片褪绿黄化,多个病斑可以互相合并形成一个大的不规则病斑,病叶交界处的叶片褪绿黄化,病斑中间变灰白色。从发病地区苗圃采集发病带菌材料,经过分离后获得代表性菌株PTG,通过致病性测定确定该菌株为菩提树炭疽病的致病菌。经过观察,病原菌在PDA培养基上菌丝灰白色,绒毡状,5-7d时在菌落表面出现橘红色孢子,后期变为黑色。菌落的生长速率为9.5mm/d。分生孢子透明无色单胞,圆柱状,两端钝圆,表面光滑,无隔膜,大小为14.6-21.7×3.5-6μm。附着孢椭圆形或不规则,褐色或深褐色,大小为7.49-9.86×6.14-8.63μm。将病原菌的ITS、ACT、CHS-1、TUB2、GAPDH五个基因位点进行测序,将序列在GeneBank中进行比对,发现各个基因位点序列同源性最高的菌株均为胶孢炭疽菌(Colletotrichum Cgloeosporioldes)。将五个基因位点序列分别与炭疽菌属的模式菌株及属内相关种类的序列一起进行分子系统学分析,构建发育树;最后再将五个序列联合构建系统发育树,结果均与胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides 紧密结合形成一个分支。因此依据形态学、分子系统学分析及致病性测定,将菩提树炭疽病的病原菌鉴定为胶孢炭疽菌(C.gloeosporioides)。2.菩提树炭疽菌的生物学特性以及室内药剂筛选病原菌最适的生长温度为28℃,菌丝的致死温度为48℃处理20min,孢子的致死温度为50℃处理20min。病原菌在pH值为7时,菌丝生长速率最快,弱酸性或弱碱性有促进产孢的效果。光照促进病原菌产孢但不影响病原菌的菌丝生长。病原菌对各种碳源均能较好的利用,当氮源为硝酸氨的时候,病原菌菌丝生长受到抑制,菌落边缘畸形,表明病原菌不能利用硝酸氨。病原菌的室内毒力测定结果表明:咪鲜胺、苯醚甲环唑、甲基硫菌灵对菌丝生长的抑制效果最好,EC50最低的咪鲜胺达到了0.0139mg/L;咪鲜胺、苯醚甲环唑、吡唑嘧菌酯对孢子萌发的抑制效果最好,EC50最低的仍为咪鲜胺,达到了 19.02mg/L。大田药效防治实验也显示咪鲜胺的防效最好,防效达到49.12%。将筛选出来效果最佳的咪鲜胺和苯醚甲环唑进行复配,得出配比在4:6,5:5,6:4时为增效作用,咪鲜胺:苯醚甲环唑为6:4时达到最佳增效比,为1.78。室内生防菌的抑制试验结果表明,在所选用的生防菌中,抑制效果最好的是哈茨木霉GZ-5菌株。3.菩提树炭疽病的田间防治试验使用3种药剂进行田间防治试验,发现咪鲜胺防效最好,达到49.12%,甲基硫菌灵处理防效中等,为38.72%,丙环唑处理防效较差为 33.76%。
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