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机体抵抗病原微生物的侵染需要依赖于固有免疫系统和获得性免疫系统的共同作用，其中固有免疫系统是机体抵抗病原微生物的第一道天然屏障，同时它还是激活获得性免疫的基础和前提。NF-κB和IRF3是广泛存在于各种类型细胞中的转录因子，它们在宿主的固有免疫反应过程中扮演着重要的角色。经典的IKK激酶复合物(由激酶亚基IKKα和IKKβ与调节亚基IKKγ组成)与非经典的IKK激酶家族成员(由激酶IKKε与TBKl组成)分别在NF-κB和IRF3的活化过程中起着不可或缺的作用。为了更加清楚地认识转录因子NF-κB和IRF3在固有免疫反应过程中活化的分子调节机制，我们分别以IKKγ和IIKε为钓饵进行酵母双杂交筛选，并得到IKKγ相互作用蛋白ZNF216和IKKε相互作用蛋白SIKE。
ZNF216是一个未知生物学功能的锌指结构蛋白，它的N端含有一个与A20锌指结构类似的ZnF-A20锌指结构域，C端含有一个与ANl类似的ZnF-ANl锌指结构域。免疫共沉淀实验表明，ZNF216和A20一样，可以与IKKγ，RIP以及TRAF6相互作用。结构域分析试验表明，ZnF-A20锌指结构域是ZNF216与IKKγ和RIP相互作用所必需，而ZnF-ANl锌指结构域是ZNF216与TRAF6相互作用所必需。在293细胞中过表达ZNF216能够抑制TNF，IL-1，TLR4，RIP以及TRAF6诱导的NF-κB的激活，并且ZnF-A20锌指结构域是ZNF216抑制NF-κB的活性所必需。ZnF-A20锌指结构域可以与ZnF-ANl锌指结构域进行分子内相结合，并且ZNF216还可以形成同源寡聚体或与A20形成异源寡聚体。和A20不同的是，过表达的ZNF216可以促进TNF诱导的细胞凋亡。以上结果表明，ZNF216在调控NF-κB活化和细胞凋亡的过程中与A20既存在功能上的重叠又扮演着不同的角色。
SIKE((S-)uppressorof(IK-)K(ε-))是一个与IKKε和TBKl相互作用的含有Coiled-coil螺旋结构蛋白。在生理条件下，SIKE与TBKl相结合，当细胞受到病毒感染或TLR3受体活化时，SIKE从TBKl上解离下来。过表达的SIKE能够分别阻断病毒感染和TLR3受体活化所诱导的IRF3活化信号复合物RIG-I-VISA-TBKl/IKKε-IRF3与TRIF-TBKl/IKKε-IRF3的形成，而对病毒感染和TLR3受体活化所诱导的NF-κB活化信号复合物VISA-TRAF2/TRAF6与TRIF-TRAF6/RIP的形成则没有影响。相应的，过表达的SIKE抑制病毒感染和TLR3受体活化所诱导的IRF3的活化，用RNAi技术降低SIKE的表达则可以促进IRF3的活化，而这些对NF-κB活化都没有影响。另外，过表达的SIKE还可以抑制IKKε和TBKl介导的细胞抗病毒反应。以上结果表明，SIKE是一个IKKε和TBKl的生理抑制因子，在病毒感染和TLR3受体活化所诱导的IRF3的活化过程中扮演抑制角色。
综上所述，我们分别克隆出转录因子NF-κB和IRF3活化途径中的负调控基因ZNF216和SIKE并对它们进行了功能研究。本研究的结果有助于进一步了解NF-κB和IRF3活化的分子调节机制，从而更加清楚地认识它们在炎症及抗病毒固有免疫反应过程中的作用，为今后相关疾病的治疗奠定理论基础和提供分子靶标。