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目的:体外培养前脂肪细胞并分别与PLGA支架,胶原支架以及透明质酸支架复合,研究三种不同支架材料的细胞相容性;同时选出最佳的接种培养方式。
材料和方法:(1)术中切取成年女性腹部皮下脂肪组织,采用胶原酶消化的方法分离培养了人前脂肪细胞,通过细胞形态学观察、油红O染色对细胞进行鉴定并观察原代培养的人前脂肪细胞的增殖和分化过程,同时绘制前脂肪细胞生长曲线。(2)将传代后的前脂肪细胞分别与PLGA支架、胶原支架以及透明质酸支架复合,采用MTT法观察三种不同支架材料的细胞相容性(即细胞与材料之间的亲和性、增殖力)。(3)以透明质酸作为支架,考察静态和水平摇床两种接种方式对前脂肪细胞在支架上接种率的影响。
结果:(1)前脂肪细胞可以在体外成功地分离、培养,能定向分化为脂肪细胞,并可以进行传代扩增。(2)前脂肪细胞与三种不同支架材料亲和性比较:透明质酸支架>胶原支架>PLGA支架。透明质酸支架与PLGA支架相比较,有显著性差异。透明质酸支架与胶原支架比较有差异,胶原支架与PLGA支架相比较有差异。(3)由生长曲线,可以看出前脂肪细胞在PLGA,胶原以及透明质酸三种材料上生长良好,其中透明质酸支架效果更佳。(4)水平摇床的接种率约为89.32﹪,高于静态培养的80.39﹪,两者相比P<0.05,有统计学意义。
结论:(1)同PLGA、胶原相比,透明质酸更加适宜作为组织工程化脂肪的支架材料。(2)水平摇床的接种培养可提高细胞与支架材料之间的接种率,优于静态培养。