论文部分内容阅读
鸡传染性贫血病(ChickenInfectiousAnemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(ChickenInfectiousAnemiaVirus,CIAV)引起的一种主要侵害雏鸡的免疫抑制性传染病.该研究在构建了表达CIAVM9905株VP1、VP2的重组杆状病毒的基础上,进行了重组病毒表达蛋白的免疫保护性试验.该研究根据已发表的Cux-1序列,设计了一对引物,以CIAVM9905株DNA为模板,应用PCR方法扩增了VP1基因,然后克隆到pBluescript载体质粒中,并对其进行核苷酸序列测定和分析.将已克隆的CIAVM9905株VP1基因和VP2基因插入杆状病毒表达质粒pFastBacDUAL中,使其分别处于p10启动子和Ppolh启动子控制之下;构建了分别含CIAVM9905株VP1、VP2单基因和VP1、VP2双基因的杆状病毒重组表达载体pFBDVP1、pFBDVP2和pFBDVP12.以重组杆状病毒表达载体质粒pFBDVP1、pFBDVP2和pFBVP12分别转化大肠杆菌DH10BAC感受态细胞,得到重组转座子rBacmidVP1、rBacmidVP2和rBacmidVP12.用重组杆状病毒rBacmidVP1,rBacmidVP2,rBacmidVP12表达的蛋白分两次免疫SPF鸡,在不同时间采血、分离血清,间接ELISA检测血清中CIAV特异的抗体反应,结果显示重组蛋白可诱导机体产生较强的体液免疫反应,具有良好的免疫原性.