急性白血病患者单个核细胞信息与热证的相关性研究

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目的:对急性白血病(AL)原代单个核细胞(MNC)信息与热证的相关性进行初步的探索,为细胞信息与中医证的相关性研究提供思路与方法学基础,可以为AL的宏观证候信息做补充,在一定程度上为AL的中医辨证治疗和选择疗效评价指标提供依据。方法:根据证素“热”积分将AL患者分为热证组、非热证组,分别采用:①MTT法检测AL患者MNC的增殖情况;②NBT法检测MNC的分化情况;③通过相差显微镜下细胞计数来观察MNC与脐静脉内皮细胞(HUVEC)的粘附力;④Millicell小室检测MNC的迁移力。此外,采用MTT法检测经过4℃、37℃、45℃保存4h后的白血病细胞株(K562、HL-60、U937)的增殖情况,对样本自抽取出来到运输至实验室这段时间的保存温度进行初探。使用统计软件Spss16.0对实验数据进行统计分析。结果:12例初诊AL患者经过证素辨证后,将证素“热”积分≥100分者归为热证组,共6例;“热”积分≤70分者为非热证组,共6例。1.MNC的增殖:在Oh与24h时,AL患者的MNC的增殖活力在热证组、非热证组之间的差异无统计学意义(P>0.05);在48h时,热证组AL患者的MNC的增殖活力显著低于非热证组AL患者的MNC的增殖活力(P<0.05)。在0-24h间热证组、非热证组AL患者的MNC的增殖情况均呈上升趋势;在24-48h间热证组AL患者的MNC的增殖情况呈明显下降趋势,而非热证组AL患者的MNC的增殖情况较为平缓。2.MNC的分化:AL患者的MNC的分化情况在热证组、非热证组之间的差异不具有统计学意义。3.MNC的迁移:不同AL患者的MNC迁移率最小值为0.207,最大值为0.671,但其在热证组、非热证组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。4.MNC与HUVEC的粘附:不同AL患者的MNC与HUVEC的粘附值最小值为71.9,最大值为231.1,但其在热证组、非热证组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。5.保存温度:三种白血病细胞株经过4。C、37℃、45℃保存4h后,与37℃、5%C02培养的正常对照细胞相比,45℃保存的白血病细胞的增殖受到抑制,而4℃、37。C保存的白血病细胞的增殖与正常细胞无差异。结论:1.AL患者MNC的增殖与热证存在一定的联系;从本实验有限的样本结果来看,AL患者MNC的分化与热证存在联系的可能性较小。2.不同AL患者的MNC的粘附力与迁移力存在差异,其白血病细胞侵袭转移的能力有所不同,但与热证可能不存在联系。3.在样本自抽取出来到运输至实验室这段时间(小于4h)里,将样本置于4℃,对于其细胞的增殖活性无显著的影响,说明样本运输时的保存温度可行。
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