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目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factors,VEGF)及其受体Flt-1在实验性鼠牙髓炎中的表达变化及其分布规律,并进一步探讨其在牙髓炎症发生发展过程中可能的作用机制。这将有助于全面深入地了解牙髓组织中的炎症介质、完善牙髓炎的发病机制;为研究牙髓炎的治疗策略垫定理论及实验基础。 方法 依据处死时间不同将大鼠随机分成5组,即0d组、1d组、3d组、5d组、7d组,建立大鼠实验性牙髓炎模型。分别于术后1、3、5、7d将大鼠处死,40g/L多聚甲醛固定液行心内灌注30min,迅速截取双侧上颌磨牙区组织再固定48h,而后经10%EDTA脱矿液脱钙3周。酒精梯度脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,制备切片,厚7μm。采用免疫组化(SABC法)对VEGF及其受体Flt-1进行染色。使用显微照像系统及MetaMorph图像分析软件分别对牙髓组织中的VEGF及其受体Flt-1染色阳性部位进行灰度值测定,取测得结果的平均值作为VEGF/Flt-1含量的最终结果。采用单因素方差分析(ANOVA)、Tukey检验及Pearson相关分析进行统计学处理。显著性水平定为:P<0.05时有显著性差异,P<0.01时有高度显著性差异。 结果 VEGF在正常牙髓的血管内皮细胞、成牙本质细胞及部分成纤维细胞的胞浆中呈阳性着色。在炎症牙髓中VEGF的表达明显增强,且随时间呈递增趋势;在炎症浸润的中性粒细胞及单核/巨噬细胞呈强阳性着色;而在成纤维细胞及成牙本质细胞的阳性表达减弱。图像分析结果显示,与正常组相比,炎症各组VEGF的表达均显著性增强(P<0.01);炎症各组之间比较发现,随炎症加重,VEGF的表达呈递增趋势,其中3d与1d比较无显著性差异(P>0.05),sd与3d比较差异显著(P<0.05),其它各炎症组之间比较均具有高度显著性差异(P<0.01)。 nt一1主要在血管内皮细胞、成牙本质细胞、前期牙本质及炎症浸润细胞中表达。图像分析结果显示,除炎症ld组与正常组相比无统计学意义(P>0.05)之外,其它炎症组Rt一1的表达与正常组相比均有高度显著性差异(P<0.01);炎症各组之间比较发现,nt一1的表达呈轻度递增趋势,其中3d与ld、sd与3d、7d与sd比较无显著性差异(p>0 .05),其它各炎症组之间比较均有统计学意义。 Pearson相关分析显示,VEGF与凡t一1在牙髓中的表达呈高度正相关关系,r二0.717(P<0.01)。结论 VEGF/nt一1系统在炎症牙髓中的表达随时间呈递增趋势,在炎症浸润细胞中表达显著,表明其参与牙髓炎症的发生发展过程,并在其中发挥作用。 VEGF/Flt一1系统在炎症牙髓的成纤维细胞及成牙本质细胞中表达减弱,推测其未能在受损牙髓的修复反应中发挥充分作用,牙髓炎症进一步发展扩散。 VEGF通过与受体凡t一l结合,介导牙髓组织的炎症反应,二者之间具有高度正相关关系。