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目的:骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种常见的慢性关节病。其发病率随着年龄增长逐渐增加。其病理特征为原发或继发性的关节软骨病变,具体表现为关节软骨胶原蛋白降解、蛋白多糖降解和关节软骨结构破坏,同时也会导致一定程度的滑膜炎症。WHO数据显示,10%男性及18女性%以及65%年龄超过60岁的人都患有不同程度的骨关节炎。虽然OA的病因是比较复杂的(遗传,体质,生物力学因素),但我们对OA的发病机制的认识正不断加深。骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)是一种广泛分布于人体组织中,具有多种功能的磷酸化蛋白。OPN可由多种细胞分泌,包括巨噬细胞、淋巴细胞、上皮细胞、血管平滑肌细胞、滑膜细胞以及软骨细胞。在骨组织中,OPN可调节细胞基质和细胞间的活动,参与骨折修复中软骨向骨的转化以及破骨细胞对骨基质的附着。骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)与骨关节炎的严重程度及疾病的发生进展密切相关,但OPN在OA发病机制中的作用尚未明确。本研究目的旨在探讨骨桥蛋白在膝骨关节炎(Osteoarthritis,OA)中的调控作用以及涉及的信号转导通路。方法:1.选取15名OA患者其中男性7例,女性8例,平均年龄61.2±8.5岁。选取同期正常对照组15例,为不伴有骨关节炎的半月板损伤或韧带损伤。对照组男性9例,女性6例,平均年龄42.4±7.8岁。Ⅱ型胶原酶一步消化法处理OA滑膜组织,分离培养OA软骨细胞并传代,取第一代OA软骨细胞继续培养。2.根据文献报道siRNA序列,合成OPN-siRNA,与OPN组作为实验组,无意义序列Con-siRNA为阴性对照组,将两组序列进行脂质体转染,采用Western Blotting检测NF-κB(nuclear factor-KappaB)p65、p-NF-κB p65的蛋白水平,将得到的Western blot图片,用IPP软件处理,得出灰密度值,进行目的蛋白NF-κB/p-NF-κB的均一化处理和内参蛋白β-actin的均一化处理,将浓度组得到的NF-κB/p-NF-κB p65的均一化结果除以β-actin的结果,得到各组的相对定量值。3.以转染Con-siRNA的OA滑膜细胞为对照组,转染OPN-siRNA、OPN、PDTC及PDTC联合OPN处理细胞为实验组。用Western blot检测MMP13表达情况。用上述方法得到各组相对定量值。结果:相比对照组,经OPN干预后,P65含量及P65磷酸化显著增加(P=0.0025,P=0.0019)。然而,OPN-siRNA处理后的P65含量及P65磷酸化相比对照组显著降低(P=0.0024,P=0.0176)。OPN可显著提高MMP13蛋白含量(P=0.0075),而OPN-siRNA可显著降低蛋白含量(P=0.0021),NF-κB抑制剂(PDTC)可明显拮抗OPN对MMP13蛋白的调控(P=0.0231)。结论:OPN可促进OA滑膜细胞NF-κB p65、p-NF-κB p65的蛋白表达,并通过激活NF-κB信号通路,促进MMP13蛋白表达。这可能是OA发病机理的重要组成部分。