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雪落樱（Cerasus xueluoensis）为珍贵的本土樱属资源,花色优美。不同于矮生樱亚属（Subg.Microcerasus）的三芽叠生以及樱亚属（Subg.Cerasus）的芽单生,雪落樱具有“三芽”与单芽共生的亚属间过度性状。开展雪落樱花芽分化的相关研究,对理解植物花芽分化具有重要的意义。但目前雪落樱花芽分化过程与分化时间尚不清楚,导致雪落樱“三芽”以及单芽共生这一过度性状产生的分子基础也尚不明确。针对上述问题本研究通过改良石蜡切片技术研究了雪落樱的花芽分化过程,并以毛樱桃和山樱花为对照,探究了雪落樱在花芽形态分化上的特异性;进而对可能导致雪落樱特异性花芽分化产生的两个MADS-box基因进行了克隆,并分析其在雪落樱中的时序性表达和组织特异性表达式样,获得了以下结果:1.雪落樱的花芽分化过程与毛樱桃和山樱花存在一定的差异。雪落樱花芽形态分化时期集中在6月初至8月中旬,持续近102 d,依次为始分化期、花序原基分化期、萼片分化期、花瓣分化期、雄蕊分化期与雌蕊分化期6个时期,到9月中旬左右雌蕊分化结束进入休眠期。雪落樱与山樱花分化时期一致,但花芽分化时间比山樱花提前,且分化时长比山樱花短;与毛樱桃花芽分化时间、分化时长接近,但分化时期不一致,毛樱桃不含花序原基分化期,从形态学角度看,雪落樱与毛樱桃相差甚远,应不属于矮生樱亚属。2.通过RACE技术克隆得到两个雪落樱MADS-box基因CxlMADS1与CxlMADS2,两者的保守结构域与保守基序分析显示两条基因编码的氨基酸序列均含有M、I、K、C区,是十分典型的MIKC型MADS-box基因。CxlMADS1与CxlMADS2基因全长分别为957 bp和1274 bp,分别含有636 bp和708 bp的开放阅读框,分别编码212和236个氨基酸,分子式分别为C1066H1755N313O338S6和C1121H1862N320O373S13,相对分子量分别为24556.91和26207.82,理论等电位pI分别为6.86和5.17,蛋白不稳定指数分别为45.3和49.98,亲水性总平均值分别为-0.818和-0.497,说明CxlMADS1和CxlMADS2均属于不稳定的碱性、亲水性蛋白。CxlMADS1与CxlMADS2基因编码的蛋白均含有大量α螺旋角,分别占58.02%和60.17%,无规则卷曲分别占28.3%和11.02%,β折叠分别占8.96%和4.72%,延链分别占4.27%和11.02%。3.保守结构域与保守基序分析显示控制着基因蛋白功能的C区相差较大,说明两个基因发挥的生物功能有所差异。同源比对分析表明,CxlMADS1与AGL6基因亲缘关系最近,故将其归类为AGL6基因,与A、B、C、D类基因共同调控四轮花器官的发育。CxlMADS2与中国樱桃休眠相关基因DAM3相似性最高,故将CxlMADS2归类为DAM3基因,DAM基因是SVP同源基因,CxlMADS2极有可能与SVP基因具有相似功能,在花发育早起决定花分生组织的特异性以及延迟开花时间。4.通过对不同组织器官的CxlMADS1与CxlMADS2基因表达分析显示,CxlMADS1基因仅在四轮花器官中表达,而CxlMADS2基因在叶子与四轮花器官中均有表达,叶子中含量最高,花瓣和雌蕊的表达量较低,可见CxlMADS1与CxlMADS2这两个基因在花芽分化过程以及花器官发育阶段具有不同的调控作用。综合研究表明雪落不属于矮生樱亚属,分化时间与毛樱桃山樱花均有不同,而克隆得到的CxlMADS1与CxlMADS2基因可能与导致雪落樱花芽分化时间及分化速率的差异有关,尤其是三者在萼片分化期的快慢,为后续验证基因功能奠定了基础,对了解植物花芽分化具有重要意义。