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目的:检测MODS大鼠模型中血清TM、MMP-9、TIMP-1的浓度变化及它们在肺、肾中的基因表达,进一步为MODS的临床研究及治疗提供基础。
方法:成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组(生理盐水组8只)、MODS模型组(32只),其中模型组又分为造模后12h、24h、48h、72h不同时相,每组8只。模型制备采用二次打击即失血加酵母多糖:大鼠左眼球取血1ml/100g,4h后4ml/100g无菌腹腔注射酵母多糖石蜡混悬液(1g/320ml),造模后分批处死并搜集标本。1.用肉眼、光镜观察肺、肾标本在不同时相时的结构变化;2.ELISA法检测MODS不同时相时血清中TM、MMP-9、TIMP-1的浓度变化;3.原位杂交测定肺、肾组织中TM、MMP-9、TIMP-1在不同时相时基因表达。
结果:1.ELISA检测显示:造模后12-72h,MODS大鼠血清中TM浓度即明显高于正常对照组(P〈0.0.-0.05),峰值见于造模后24h(P〈0.01),造模后48-72h浓度较24h有所下降,但仍显著高于正常对照组(P〈0.01-0.05);造模后12-48h,MODS大鼠血清中MMP-9浓度即显著高于正常对照组(P〈0.01-0.05),峰值见于造模后48h(P〈0.01);造模后12-48h,MODS大鼠血清中TIMP-1浓度即明显高于正常对照组(P〈0.01-0.05),峰值见于造模后48h(P〈0.01),但其升高的幅度低于MMP-9;2.原位杂交检测显示:各组织中TM的阳性表达12h组比正常对照组有所增加(P<0.01-0.05),随后下降,至24h与正常对照组TM的阳性表达无显著性差异(P>0.05),至48h-72h阳性表达与正常对照组比较均有显著性降低(P<0.01-0.05)。各组织中MMP-9的阳性表达12-72h组均比正常对照组有所增加(P<0.01-0.05)。各组织中TIMP-1的阳性表达12-72h组均比正常对照组有所增加(P<0.01-0.05)。
结论:在MODS的发生发展中血液以及组织中的TM及MMP-9、TIMP-1先升后降,对TM和MMP-9、TIMP-1的监测有利于对MODS的诊断以及病情判断。