【摘 要】
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目的 男性生殖系统内细胞因子及其对生殖功能的影响已引起广泛关注。细胞因子是一种免疫活性小分子多肽，是睾丸内各种不同细胞间繁杂的局部调节和信号传递的重要因素。在正常
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目的 男性生殖系统内细胞因子及其对生殖功能的影响已引起广泛关注。细胞因子是一种免疫活性小分子多肽，是睾丸内各种不同细胞间繁杂的局部调节和信号传递的重要因素。在正常条件下，生殖系统内的免疫细胞、间质细胞、支持细胞及精原细胞分泌TNF-α等，参与调节生殖细胞的生长与分化，对生殖系统的神经内分泌、睾丸功能以及精子发生有重要的调节作用。但截至目前，TNF-α在单倍体生殖细胞的表达国内外文献报告甚少。为证实TNF-α在精子的合成及其对精子的直接作用，本题利用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和序列测定技术从分子水平探讨TNF-α mRNA在生育正常者精子的表达情况和不育患者精子表达的变化。且证实肿瘤坏死因子受体（TNF-R2）在人精子有表达，为TNF-α对精子的直接作用提供实验证据。 方法 取13例生育正常者与30例不育患者的精液WHO标准做常规指标检查，提取精子RNA，然后逆转录为cDNA，再经PCR扩增仪扩增，扩增产物通过2％琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察、照相，在图像分析仪上与内参GAPDH相比得出相对值，数据行统计学处理。扩增产物测定其序列。用Western印迹法检测肿瘤坏死因子受体（TNF-R2）在另外15例生育正常者精子的表达。 结果 正常生育者精子内TNF-α mRNA RT-PCR得到的肿瘤坏顿卜学位i仑之丰欠.死1人】（一l’NF一（‘）eDNA为6OZbp，内参oAPD毛1于广增z·、·二物片段为23!bp门/卜一台者精TNF一u cDNA序列’J已J一民告的人其它组织自J}IJ包内一fNI了-。。l）从入l’l勺、}。c0N，、的序列完全一致。正常生育者精J二J乡JI匕化，I为0.77士0.49。不育者精子「}，TNF一uTNF-CDNA的‘}凡士匀{L{}，汇为040士0.58，沁j!浪态百分率及精子不育者的精子密度、精子活动百分率、，一!，TNF一a，nRNA的表达均牙泛著低J’丁’l:育者的精子均仃肿瘤坏死囚J二受州﹃*一洲硬‘常生一育苦。另外15{列门N卜一l之:)l‘i勺廿结沦人精J二;lJ’能会含成月几分泌细胞因子TNF一“，并以自分泌方式调竹’}丫，J二的功能，某此可以分致不育的因索:!{一能干扰不一育症患名米.，iJ汽‘f’NF一。.1‘}勺下丫zJ丈.卜i」11、」’‘;1起精液质量一l又.};午及不育，!七{JL制咬怠义了自丫进声曰讲究训一实肿琉坏死囚f受体介人精子有表达，i气受体:，川走参’、J’TNF一(l了〔人精子的信号传递及对精子功能I’lfJ调拧
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