健康和患纹枯病稻内微生物多样性差异分析及链霉菌菌株2S1-140生防潜能研究

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水稻是世界上重要的粮食作物之一,由茄丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的水稻纹枯病严重影响水稻的产量和品质,防治非常困难。本文分析了链霉菌菌株2S1-140菌株生物学特性,对该菌株进行了分子鉴定和生防效果评估;分析了健康与患纹枯病水稻内微生物多样性的差异。  本研究主要内容包括:⑴菌株2S1-140分离自水稻根际土中,其产生的发酵液和挥发性物质具有防治作物真菌病害的潜力。通过16S rDNA基因序列和形态学等方法,鉴定菌株2S1-140为灰黄链霉菌(Streptomyces flavogriseus)。在多种条件下培养链霉菌2S1-140观察其生长情况及抗菌物质的活性。结果表明,PSA培养基最有利于菌体生长,而 LB培养基最有利于菌株产生抗生物质。菌株2S1-140可利用葡萄糖、半乳糖、果糖、阿拉伯糖和肌醇等单一碳源,可利用硝酸铵、硝酸钾和半胱氨酸等单一氮源。菌株2S1-140菌体生长最适pH为7,pH=6~9范围内菌株产生抗菌物质活性大。菌株2S1-140发酵液在60°C处理后依然保持70%以上抑菌率,在100°C下处理30 min发酵液失去抗菌效果,但蛋白酶处理发酵液,其抑菌活性无明显变化。在培养皿上进行生防评估,结果表明菌株2S1-140的发酵滤液和产生的挥发性气体均对纹枯菌、稻瘟菌、灰葡萄孢、小麦全蚀菌和核盘菌等植物病原真菌的菌丝生长具显著抑制效果;虽然发酵液对禾谷镰刀菌抑制作用差,但挥发性气体能抑制其色素产生。施用菌株2S1-140的发酵滤液原液和产生挥发性气体对水稻离体叶片进行处理后,可以有效阻止纹枯菌的侵染,具有显著的生防效果,但随着发酵滤液的浓度降低抑菌效果也随之降低。⑵分别对健康和患纹枯病的水稻叶片、根际土和根内生菌的16S rDNA基因高通量测序,进行微生物多样性分析。结果显示水稻叶片内、根内及根际土中微生物呈现多样性,各部分微生物群落组成不同,且各组分所占比例变化明显。蓝藻菌门为叶片第一优势菌门,变形菌门为稻根内和根际土第一优势菌门。在患病水稻叶片微生物群落中蓝藻菌门所占比例下降,变形菌门、厚壁菌门、放线菌比例均明显增加。在患病稻叶片中未检测到Saccharibacteria,在健康稻叶片中未检测到绿弯菌。在患病稻根内微生物群落中厚壁菌门所占比例明显下降,其他含量明显上升,未检测到疣微菌门。在水稻根际土微生物群落中,在患病水稻根际土微生物群落中变形菌门、绿菌门含量上升,其他菌门含量下降明显。
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