喘息发作期儿童肠道菌群变化及其与血浆白细胞介素17关系的研究

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目的:喘息是婴幼儿期呼吸道疾病中常见症状。近年流行病学调查结果显示,婴幼儿喘息的发生率逐年增高,严重影响儿童的生命和生活质量。迄今为止,大部分研究调查了肠道菌群与诸如婴幼儿湿疹和变应性致敏一些疾病的关系,但是肠道菌群与儿童喘息的研究还很少。IL-17和Th17不仅在传统认为由Th1介导的关节炎、脑脊髓膜炎等自身免疫性疾病中发挥重要作用,还可能参与传统认为由Th2介导的过敏性疾病的发病。本实验测定喘息发作期儿童粪便中双歧杆菌(bifidobacteria)和大肠杆菌(E.coli)DNA浓度,阐释肠道菌群与儿童喘息的关系;测定喘息发作期儿童血浆中IL-17的水平,分析Th17细胞在儿童喘息发病中的作用,为日后益生菌用于防治儿童喘息及哮喘提供理论基础,为IL-17成为防治儿童喘息及哮喘的新靶点提供新思路。方法:选取伴喘息的下呼吸道感染儿童47例,其中入院前未用抗生素者22例,入院前应用抗生素5天内者25例;不伴喘息的下呼吸道感染儿童40例,其中入院前未用抗生素者18例,入院前应用抗生素5天内者22例;健康查体儿童30例。五组之间性别、年龄、体重、喂养方式、生活地域均具有可比性。本实验分两部分进行:1采用荧光定量聚合酶链式反应(Flurogenic Quantitative Polymerase Chain Reaction,FQ-PCR)技术检测各组儿童粪便双歧杆菌和大肠杆菌DNA的浓度;2采用酶联免疫吸附法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测各组儿童血浆IL-17的水平。所得数据采用SPSS 13.0统计分析软件进行统计学处理。统计学方法采用两独立样本均数比较、直线回归相关分析,以α=0.05作为检验水准。结果:1各组儿童肠道菌群定量分析A1、B1组粪便中双歧杆菌浓度、B/E值均低于C组,差异有统计学意义(P<0.05);A1组与B1、A2组比较,双歧杆菌浓度、B/E值差异无统计学意义(P>0.05);B2组双歧杆菌浓度、B/E值低于B1组,差异有统计学意义(P<0.05) (见Table 2)。2各组儿童血浆IL-17水平A1、B1组血浆IL-17水平高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。A1组血浆IL-17水平低于B1组,差异有统计学意义(P<0.05);A1与A2组比较,血浆IL-17水平无差异(P>0.05)。B1与B2组比较,血浆IL-17水平无差异(P>0.05) (见Table 3)。3喘息急性发作期儿童肠道B/E值与血浆IL-17相关分析示:A1组B/E值与血浆IL-17两者无直线相关关系(见Fig.5 )。4喘息急性发作期儿童血浆TGF-β1与IL-17相关分析示:A1组血浆TGF-β1与IL-17两者呈直线正相关关系,相关系数r=0.966(P<0.05),直线回归方程为Y=2.499 X-16.134(见Fig.6 )。结论:1研究发现,喘息急性发作期儿童,肠道菌群结构发生紊乱,表现为双歧杆菌数量减少、B/E值下降,表明肠道微生物定植抗力降低,并对其现象进行了综合分析。2下呼吸道感染儿童,无论是否出现喘息,其肠道菌群均发生紊乱。无喘息发作与喘息发作儿童肠道B/E值比较没有差异。3喘息急性发作期儿童血浆IL-17参与了发病过程,且与TGF-β1呈直线正相关关系,表明Treg细胞和Th17细胞共同参与儿童喘息急性发作的发病机制。4从本研究结果未发现喘息急性发作期儿童肠道菌群结构与血浆IL-17水平的直接关系。
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