针刺联合脐疗干预肾气虚型高龄IVF助孕结局的随机对照试验及机制探讨

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目的:观察针刺联合脐疗对高龄不孕妇女体外受精(in-vitro fertilization,IVF)助孕结局的影响,从卵泡液靶向代谢组学角度探讨其可能的作用机理。
  方法:选取高龄(35-42岁)肾气虚行IVF助孕妇女60例,按照1∶1比例随机分入实验组和高龄对照组;另选取21-35岁因单纯输卵管因素行IVF的妇女30例作为青年对照组。实验组采取常规促排卵+脐疗+针刺治疗,对照组常规促排卵。比较三组间治疗前后肾气虚证候积分、Gn用药量、HCG日子宫内膜情况、HCG日血激素水平、获卵数、2PN受精率、2PN卵裂率、优胚率、累计妊娠率之间的差异。同时,通过超高效液相-质谱联用分析系统(UPLC-MS/MS)对取卵日卵泡液进行靶向代谢组学分析,采用层次聚类分析法、多元统计分析法、主成分分析法(PCA)和偏最小二乘法判别分析法(PLS-DA)对卵泡液中目标代谢物进行鉴定,观察差异代谢物含量变化并寻找相应代谢通路。
  结果:临床结果:1.三组Gn用药量、HCG日子宫内膜厚度及分型、HCG日雌激素水平相比,差异无统计学意义(P>0.05)。2.实验组和高龄对照组治疗后肾气虚证候积分差异有统计学意义(P<0.05),而实验组治疗前后肾气虚证候积分比较亦有统计学意义(P<0.05)。3.三组获卵数、2PN受精率、2PN卵裂率、优胚率、累计妊娠率相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。
  实验结果:1.与高龄对照组相比,实验组共鉴定出28种差异性代谢标志物,其中上调代谢物为Retinyl palmitate、Sn-Glycero-3-phosphocholine、LysoSM(18∶0)、L-cysteine、Linoleic acid、Glycocholic acid、Docosahexaenoic acid、Dihomolinoleic acid、25-hydroxyvitamin D3,共9种;下调代谢物为Methionyl-proline、Metanephrine、Glycine、Pyruvic acid、Uridine、Phytosphingosine、Progesterone、Retinol、LysoPC(16∶1)、Lipoamide、Indoleacetic acid、Indole、Hydroxy Retinoic acid、Guanidinoacetic acid、Decanoylcarnitine、Acetylcholine、3-Sulfopyruvic acid、4-Oxo-retinoic acid和3-Carboxy-4-methyl-5-propyl,共19种。2.这些代谢物共涉及3条与卵母细胞发育潜能密切相关的代谢通路,分别是:视黄醇代谢(Retinol metabolism)通路;甘氨酸、丝氨酸及苏氨酸代谢(Glycine,serine and theonine metabolism)通路;甘油磷脂代谢(Glycerophospholipid metabolism)通路。
  结论:1.针刺联合脐疗可明显改善高龄IVF患者肾气虚证候并显著提高其获卵数、2PN受精率、2PN卵裂率、优胚率及累计妊娠率。2.针刺联合脐疗可能通过调控视黄醇代谢(Retinol metabolism)、甘氨酸、丝氨酸及苏氨酸代谢(Glycine,serine and theonine metabolism)以及甘油磷脂代谢(Glycerophospholipid metabolism)通路,催化Retinyl palmitate、Glycine、LysoPC(16∶1)代谢酶活性,调节差异性代谢标志物含量,进而提高卵母细胞质量,改善高龄肾气虚证患者IVF助孕结局。
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