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由于猪精子冷冻后成活率、人工授精繁殖率较低,使得猪精液冷冻保存技术难以得到推广。为了进一步提高冷冻-解冻后猪精液品质和精子抵抗低温打击的能力,本试验以甘露醇、绞股蓝多糖、马齿苋多糖和海带多糖作为冷冻保护剂,以冷冻解冻后精子的活力、活率、线粒体活性、质膜完整率和顶体完整率作为评价指标,利用碘化丙啶(PI)、罗丹明123、低渗肿胀试验(HOST)和异硫氰酸荧光素连接的花生凝集素(PITC-PNA)分别检测了精子的活力、线粒体活性、质膜完整率和顶体完整率。同时研究了不同的冷冻前处理和甘油含量对精液冷冻后精子的活力、活率、线粒体活性、质膜完整率和顶体完整率以及冷冻解冻对抗氧化酶活性的影响,得到如下结果:1.猪精液冷冻过程中,在传统的稀释液TCG基础上,添加2 mg/mL的甘露醇、0.25-0.5 mg/mL的绞股蓝多糖、0.25 mg/mL的马齿苋多糖、0.5-1.5 mg/mL的海带多糖均可提高猪精子冻后活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性(P<0.05)。整体来看,海带多糖的保护效果较好。2.在对精液冷冻前预处理中:采用先平衡,后弃精浆的精液处理程序;弃去6/7的精浆;稀释液中甘油浓度为3%,分别含有2 mg/mL甘露醇、0.5 mg/mL绞股蓝多糖、0.25 mg/mL马齿苋多糖和1mg/mL海带多糖时,均取得了较好的冷冻解冻效果(p<0.05)。5.平衡、冷冻解冻对精子内SOD、CAT和GSH-Px酶活力都有影响。整个冷冻过程中,精子内三种酶活力均呈下降趋势;添加不同浓度的三种多糖,以TCG作为对照,检测平衡后和冷冻解冻后精子内SOD、CAT、GSH-Px三种酶的活力。平衡后,绞股蓝多糖添加组和马齿苋多糖添加组中,精子内三种酶活力与对照组比较差异不显著(p>0.05);添加0.5和1.0 mg/mL海带多糖的精子中SOD活力下降的较少(p<0.05);添加1.0mg/mL的海带多糖时,CAT酶活力与对照组比较差异显著(p<0.05)。冷冻解冻后,添加0.5 mg/mL-1.0 mg/mL绞股蓝多糖、0.25 mg/mL马齿苋多糖和1.0 mg/mL海带多糖,精子内SOD和CAT有明显提高(p<0.05)。