胶原酶对肌腱粘连影响的实验研究

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前言 肌腱损伤手术后粘连是常见的临床难题之一,预防肌腱粘连也是目前手外科重要课题。本研究利用胶原酶独特的生物作用,将其应用在损伤的肌腱周围,观察腱鞘内肌腱粘连形成情况,探索预防肌腱粘连的新方法。 实验材料 实验动物:力行鸡64只,体重1.1—1.9kg(千山谷金饲料厂提供)。随机分成2组,每组32只,左足的Ⅲ趾为对照趾和实验趾。 实验药品:0.5%氯胺酮、10%福尔马林溶液、0.9%的氯化钠注射液、胶原酶(为国内研制的注射用粉剂1200U/瓶,生理盐水溶解后使用)。 主要的实验仪器:SWD-10型拉力机、光镜、病理切片机等设备。 实验方法 力行鸡64只随机分成实验组和对照组,每组各32只。动物行氯胺酮(50mg/kg)肌肉注射麻醉。俯卧位,双腿和双翅固定于手术板上,碘伏消毒铺巾。在鸡的左足第3趾掌指关节处上止血带,在第3趾近、远侧趾间关节间做侧方正中切口,长约2.5cm,切开皮肤及皮下组织,显露屈趾肌腱纤维鞘,侧方纵行切开,从趾浅屈肌腱分叉处,锐刀横断屈趾深肌腱,形成趾深屈肌腱断裂模型。用5/0无损伤尼龙线,采用改良Kessler法缝合肌腱及缝合腱鞘。实验趾经腱鞘缓慢注入胶原酶100U(0.15ml),对照趾注入生理盐水0.15 ml。所有手术侧下肢于踝关节屈曲 50%位,趾间关节屈曲15%位管型石膏外固定,6周后解除外固定。 观察方法:术后2,4,6,8周各处死每组动物8只,膝关节上方离断实验足,进行下列测试。 1.生物力学测定: 分别于术后2广为在周各处死1组动物。实验足固定在测试台上,取力行鸡左足第3趾,踝关节上离断取标本,足掌部切开显露皿趾屈深肌增,进行屈趾深肌耀功能测定。门)肌虚滑动距离测定:将屈趾深肌腔固定在拉力架上用L94N拉力(拉伸速度20mrn/min)从踝上切口将肌腔拉出,测量被拉出肌键的长度。用于反映肌胆滑动力情况及粘连程度。p)肌解吻合口抗张力强度测定:取粘连性状观察后的实验足取出吻合的肌胆,保留吻合口上下各 Icm长度,并小心抽出吻合肌源用的线,在屈肌腰近端逐渐增加悬挂重量,测量引起吻合口断裂的重量。 2.粘连性状观察: 每组均随机取5个实验足,对实验趾和对照趾肌源吻合处做逐层解剖,观察吻合口周围粘连情况、肌胆移动情况及肌胆愈合情况。健周粘连情况按文献 L中华手外科杂志 1992年第 8期汤锦波.各种伤情下屈肌腾的愈合和粘连形成——一肌跨愈合新理论系统的探讨」的方法分成5级。 3.组织学检查: 每组余下的3个未解剖的实验足截取实验趾和对照趾,用10%福尔马林溶液固定48小时后,用5%的硝酸脱钙2周。将约二.5 cm标本均等分为三段,分别脱水和石蜡包埋,每段横切片二枚,厚度 5 rm,行 HE染色后光镜观察,观察肌增周围胶原含量、成纤维细胞的数量及粘连带的多少。 4.统计学方法: 计量数据以均数。标准差k。S)形式表示,肌源拉力组间比 ·2·较采用 t检验,以 P值<0.05认为有统计学差异。 结 果 一。生物力学测定: (一)肌雅滑动距离测定: 表 1 各组实验趾和对照趾肌键滑动距离*m*k。s) 术后(周)对照趾 实验趾 20.6见土0.1乃0.997士0刀43”” 40.6叨土0.0950.864土0.031” 6 0.602上 0.110 0.882土 0.052” 8 0.660 t 0.095 0.98 0.030” n=8:P<0.05””:P<0.01 (二)肌解吻合口抗张力强度测定: 表2 术后趾深屈肌腾吻合口抗张力强度*八k。s) 术后(周)对照趾 实验趾 二 740土94 750t55 4 1470土74 1410土75 6 二*见土m 兆30土3O 8 硼IO土10 *皿O土ZO n=5:P < 0.05””:P<0.of 二、粘连性状观察 1.术后2周: 对照组:肉芽组织较实验组明显增多,中等致密粘连,吻合口 处最严重。 ·3·实验组:有少许肉芽组织与胆鞘膜状粘连。2.术后4周:对照组:有致密粘连,肉芽组织增生、增宽,锐性分离后见吻合 口已愈合,肌膜移动性差。实验组:实验趾胆周无明显肉芽组织及膜状粘连。吻合口愈 合良好,肌胆移动性良好。3.术后6-8周:对照组:胆周无明显间隙,粘连较重,粘连带较多,锐性分离见 腾吻合周围覆盖一层授痕组织,臆断端已愈合。肌胆 有一定移动性。实验组:胆周有明显间隙,表面向芽组织较少、粘连轻、无明显 粘连带。摄痕组织较对照组少、腾己愈合。肌雅移动 性好。 表3 肌健粘连性状的分级术后(周)对照趾 实验趾 ZW
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