【摘 要】
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目的 筛选出山核桃叶黄酮(山核桃叶黄酮、白杨素、查尔酮、松属素、汉黄芩素、小豆蔻明)抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖的有效药物及有效浓度,通过山核桃叶黄酮对U266细胞株
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目的 筛选出山核桃叶黄酮(山核桃叶黄酮、白杨素、查尔酮、松属素、汉黄芩素、小豆蔻明)抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖的有效药物及有效浓度,通过山核桃叶黄酮对U266细胞株抑制增殖诱导凋亡作用观察。探讨研究山核桃叶黄酮对相关凋亡蛋白表达的影响。方法①药物筛选,普通光镜观察山核桃叶黄酮(山核桃叶黄酮、白杨素、查尔酮、松属素、汉黄芩素、小豆蔻明)对U266细胞增殖作用的影响,通过计算抑制率筛选有效药物。②采用CCK-8法观察山核桃叶黄酮作用U266细胞24小时后,U266细胞的增殖抑制率,筛选有效药物浓度。③普通光镜及荧光显微镜(AO/PI染色)观察山核桃叶黄酮作用U266细胞24小时后细胞的凋亡形态学变化。④应用流式细胞仪检测山核桃叶黄酮作用U266细胞24小时后细胞凋亡率。⑤采用Western Blotting技术检测PTEN+P13K/AKT信号通路中相关蛋白在山核桃叶黄酮处理U266细胞24小时后的表达量。结果①山核桃叶黄酮、小豆寇明及汉黄芩素能明显抑制U266细胞的增殖,山核桃叶黄酮抑制作用最强,IC50为39.92ug/mL。②CCK-8结果提示山核桃叶黄酮具有抑制U266细胞增殖的作用,其抑制U266细胞增殖呈明显的量效关系。③镜下可见U266细胞发生典型的凋亡形态学变化。④流式细胞术检测细胞凋亡率,结果说明山核桃叶黄酮诱导U266细胞凋亡作用明显,呈浓度-效应依赖关系。⑤Western Blotting检测结果表明山核桃叶黄酮可通过下调P-AKT蛋白表达量,上调PTEN蛋白的表达量发挥作用,诱导人多发性骨髓瘤U266细胞凋亡。结论 山核桃叶黄酮能显著降低P-AKT蛋白的表达量,同时提高U266细胞PTEN蛋白的表达水平,达到抑制U266细胞增殖,促进U266细胞凋亡的效果,且呈剂量依赖性。
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