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临床上多种原因可导致气管狭窄，切除病变气管行气管端端吻合术是最理想的方法。但是气管长距离大范围缺损无法行端端吻合，就需要采用气管重建的方法。气管移植被认为是气管重建的首选方法，但同种或异种气管移植在应用于临床之前面临着诸多需要解决的问题，如供体气管的储存、移植后免疫排斥反应的控制及气管软骨再生等。既往抑制免疫排斥反应的主要手段是应用免疫抑制剂，但是气管肿瘤病人明显不适用此种方法。由于导致气管狭窄的原因当中肿瘤是第一位的，所以寻求其他可以抑制移植后免疫排斥反应方法是近年来研究的热点。在研究中发现，降低移植物抗原性可采用冷冻法和去上皮细胞法，其中深低温冷冻法最为常用。冷冻后的组织既可以保持其原有的活性和组织完整性，又能削减其免疫原性，这样既解决了供体的保存问题，又解决了移植后免疫排斥反应的控制问题。但冷冻时间的长短是直接影响移植气管是否成功的关键之一，过长将会降低移植物生存力，过短则达不到降低免疫排斥反应的目的。合适冷冻时间的选择成为解决深低温冷冻气管移植成功的关键之一。
目的：本实验通过研究在深低温(-80℃)条件下，对大鼠气管移植体不同的冷冻保存时间后再移植到受体后的大体及病理改变，进一步了解不同深低温冷冻时间对大鼠气管移植体各组织活性及免疫原性的影响（对气管移植体的上皮、单核细胞的影响），探讨同种异体大鼠气管移植的可行性及所需冻储的最短时间，为今后深低温冷冻气管移植的临床应用提供实验依据。
方法：切取SD大鼠气管段后分别移入注满冷冻保护液的冻储管(2ml)中，放置于4℃冰箱中平衡4小时，采用程控降温仪程序降温，降温速率1℃/分，降至-80℃迅速投入液氮中保存。冷冻保存后，取出冻储管置于37℃恒温水浴箱中，轻轻摇动，使气管段均匀快速解冻复温。Wistar大鼠随机分为4组，分别将冷冻10天，20天，30天后的SD大鼠5个气管软骨环作为供体气管移植体，行同种异体异位移植，包埋于Wistar大鼠腹腔大网膜内。于术后4周取出气管移植体，行大体及HE染色相关病理病理学观察，免疫组织化学法检测各组CD3阳性细胞浸润的情况。
按冷冻时间不同分为冷冻组与对照组（F组），其中冷冻10天组为C1组，冷冻20天组为C2组，冷冻30天组为C3组。
组织病理采用石蜡切片HE染色观察；免疫组化采用SP法.应用SPSS11.5统计软件分析试验结果。
结果：
1、我们采用石蜡切片HE染色方法对气管移植组织病理进行观察发现：SD大鼠冷冻组气管移植体管腔通畅度优于未冷冻组；冷冻组各组气管移植体与未冷冻组（对照组）气管移植体相比外观颜色略显苍白。在移植之前冷冻组的上皮细胞数纤毛缺失，正常的假复层柱状纤毛上皮已经被鳞状上皮所取代，气管腺几乎失。移植4周后发现气管体内表面少量上皮覆盖，其中少量为鳞状上皮。F组与C1组移植4周后气管内可见纤毛上皮脱落明显，主要为鳞状上皮覆盖，气管腺几乎消失。各组气管环间、纤维外膜层及粘膜下层可见新生毛细血管生成，C2组和C3组毛细血管管腔通畅，而F组和C1组可见少量新生毛细血管内有血栓生成。
2、我们应用免疫组织化学方法，分析未冷冻及冷冻组CD3阳性细胞浸润，根据改良的Shimizu方法着色程度积分观察各组分别为：在F组，其阳性表达共8例，其中强阳性6例，阳性1例，弱阳性1例；在C1组，其阳性表达共8例，其中强阳性6例，阳性1例，弱阳性1例，阴性0例：在C2组，其阳性表达共8例，其中强阳性2例，阳性3例，弱阳性3例，阴性0例；在C3组，其阳性表达共3例，其中强阳性1例，阳性1例，弱阳性1例，阴性5例；结果显示，CD阳性细胞的表达在C1组与F组相比差异不显著(P＞0.05)，在C2组、C3组表达显著低于F组(P＜0.05)，C2组与C3组CD3阳性表达存在显著差异(P＜0.05)，且随着冷冻时间的延长，其表达逐渐递减。
结论：
1深低温冷冻可降低气管移植体的抗原性，减轻移植后的免疫排斥反应，异体异位移植后，气管移植体管腔结构保持良好，可长期存活。
2对各组气管移植体行术后抗原性及再上皮综合比较，深低温冷冻异体异位移植的最佳冷冻时间为30天。