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[目的]
柚皮素(Naringenin)是一种黄酮类化合物，具有多种生物学活性和药理作用。本实验探讨了柚皮素和顺铂(DDP)对人肺癌细胞A549的增殖、凋亡及细胞周期的影响，为肺癌的治疗提供一些实验依据。
高良姜(Alpinia officinarum Hance)是著名的十大南药之一，在医药、食品和化妆品加工以及蔬果保鲜上有重要的作用。主要化学成分包括挥发油、二芳基庚烷类、淄醇类和黄酮类化合物，具有很强的药理作用。高良姜挥发油主要成分为1，8-桉叶素、2，2-二甲基环氧乙烷、葵烷、α-萜品醇、莰烯、樟脑、β-蒎烯、柠檬烯等。本实验通过对高良姜挥发油对人肺癌细胞A549的增殖、凋亡及细胞周期影响的研究，探讨其分子作用机制，旨在拓展新的植物化学药物治疗方法，为肺癌的多模式治疗提供实验资料。
[方法]
通过体外培养人肺癌A549细胞，利用MTT法分别检测柚皮素、柚皮素和顺铂(DDP)联合用药、高良姜挥发油对A549细胞增殖的影响，Hoechst33258/PI染色检测A549细胞形态学变化以及流式细胞术(FCM)PI染色法检测细胞周期的改变。Western blot检测高良姜挥发油处理A549细胞24h后PARP，Bid，Caspase-3及Caspase-8蛋白的表达。用pcDNA，pcDNA-Bcl-2，pcDNA-Bcl-xl质粒转染A549细胞后，高良姜挥发油处理A549细胞24h，Western blot检测Bcl-2，Bcl-xl，PARP，Bid，Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达。
[结果]
(1)顺铂、柚皮素联合用药24h后，顺铂、柚皮素浓度为(16μM，12.5μM～100μM)时，与(16μM，0μM)组相比，抑制人肺癌A549细胞增殖。同样当顺铂、柚皮素浓度为(32μM，12.5μM～100μM)时，与(32μM，0μM)相比，抑制人肺癌A549细胞增殖。
(2)流式细胞仪分析显示：不同浓度的柚皮素处理A549细胞24h后，与对照组相比，G1期细胞减少，S期及G2期细胞增多，说明柚皮素能影响A549细胞周期，使细胞停滞于S期及G2期，有利于细胞DNA的合成但阻止细胞分裂。
(3)不同浓度高良姜挥发油分别处理24h后，人肺癌细胞A549的生长增值受到明显的抑制，并呈现浓度依赖关系。
(4)不同浓度高良姜挥发油处理A549细胞24h后，荧光染色显示胞核固缩碎裂，呈大小不等的不规则块状、圆形或花瓣状，出现典型的细胞凋亡形态学变化。
(5)流式细胞仪分析显示：不同浓度高良姜挥发油处理A549细胞24h后，与对照组相比，G1期细胞增加，S期及G2期细胞减少，说明高良姜挥发油能影响A549细胞周期，使细胞停滞于G1期。
(6)不同浓度高良姜挥发油处理A549细胞24h，Bid，Caspase-3，Caspase-8及PARP蛋白表达明显高于对照组。
[结论]
柚皮素有增强顺铂对人肺癌A549细胞生长增殖的抑制作用，并能诱导A549细胞产生G2/S期阻滞。高良姜挥发油体外具有对人肺癌A549细胞增殖抑制作用，并具有剂量的依赖性，并能诱导A549细胞产生G1期阻滞，其作用机制可能是通过上调PARP、Bid、Caspase-3及Caspase-8蛋白表达，诱导细胞凋亡。我们初步探讨了柚皮素、高良姜挥发油对人肺癌A549细胞增殖的作用及作用机制，为其作为抗癌药物的研发提供一定的理论和实验依据。