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目的:用含幽门螺杆菌NCTC11637(Helicobacter pylori，Hp)毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A，cagA)的真核表达载体pcDNA3.1ZEO(-)/cagA转染胃癌细胞构建稳定转染胃癌细胞模型;用幽门螺杆菌NCTC11637直接感染胃癌细胞建立细胞模型，运用蛋白质组学的研究方法，寻找并鉴定差异蛋白，为幽门螺杆菌感染引起胃癌的发病机制提供一定的理论和实验依据。 方法:采用本课题组保存的真核表达载体pcDNA3.1ZEO(-)/cagA稳定转染SGC-7901胃癌细胞株;培养幽门螺杆菌NCTC11637感染AGS细胞和SGC-7901胃癌细胞株;分别提取感染与转染细胞总蛋白进行双向电泳。ImageMaster6.0分析2D胶，寻找三组实验重叠的差异点。液相色谱-串联质谱(Liquid Chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS)对差异蛋白进行分析、SEQUEST软件进行鉴定，经NCBI查询蛋白质相关信息。 结果:对成功构建的稳定细胞株SGC-7901/cagA，以及Hp感染的高表达CagA胃癌细胞分别行双向电泳后，得到结果如下: 1.AGS感染实验:AGS PC（活Hp感染的AGS细胞）与AGS NC（死Hp感染的AGS细胞）组:通过双向电泳，分别分离的蛋白质有1373和1120个，共有39个蛋白质斑点在两组凝胶中有显著差异表达，其中蛋白表达上调的有25个，蛋白表达下调的有14个; 2.SGC-7901感染实验:SGC-7901 PC(活Hp感染的SGC-7901细胞)，SGC-7901NC(死Hp感染的SGC-7901细胞)通过双向电泳，分别分离的蛋白质有1220和1332个，共有51个蛋白质斑点在两组凝胶中有显著差异表达，其中蛋白表达上调的有22个，表达下调的蛋白有29个;3.稳定转染实验:SGC-7901/cagA PC(含cagA的真核表达载体稳定转染SGC-7901组)与SGC-7901/cagA NC（含cagA的真核表达载体稳定转染SGC-7901对照组）:通过双向电泳，分别分离的蛋白质有941和977个，共有45个蛋白质斑点在两组凝胶中有显著差异表达，在SGC-7901/cagA PC中表达量升高的蛋白斑点有26个，在SGC-7901/cagA NC中表达量升高的蛋白斑点有19个。对所选取的15个差异蛋白进行质谱分析鉴定，得到乳酸脱氢酶、钙网织蛋白、二氢硫辛酰胺脱氢酶前体等，这些蛋白质功能涉及细胞代谢、信号转导、氧化应激等。 结论:1.成功建立Hp感染胃癌细胞株SGC-7901、AGS感染模型; 2.成功建立pcDNA3.1ZEO(-)/cagA稳定转染胃癌细胞株SGC-7901模型; 3.通过蛋白质组学对Hp及其对照感染胃癌细胞株SGC-7901、AGS，pcDNA3.1ZEO(-)/cagA稳定转染胃癌细胞株SGC-7901及其对照进行研究，总共筛选出15个共同蛋白差异点，鉴定出11个蛋白，这些蛋白可能为胃癌致病机制提供一定线索。