【摘 要】
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/Apo2L)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一,可溶性TRAIL能迅速诱导一系列肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性,因而是一种具有良好应用前景
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肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL/Apo2L)是肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员之一,可溶性TRAIL能迅速诱导一系列肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性,因而是一种具有良好应用前景的抗肿瘤蛋白。然而作为药物蛋白,TRAIL也存在蛋白固有的不稳定性,因此本文主要针对TRAIL蛋白的不稳定因素进行了研究。首先,研究了蛋白浓度、NaCl浓度以及磷酸缓冲液离子强度对TRAIL蛋白稳定性的影响。微生物对TRAIL蛋白的生物降解作用及羟自由基对TRAIL蛋白的氧化降解作用。其次,研究了pH值和Zn2+对TRAIL蛋白聚集体形式的影响：在酸性条件下TRAIL蛋白三聚体转化成高聚体形式；去除了Zn2+的TRAIL主要以单体的形式存在；并且pH和Zn2+对TRAIL的影响是可逆的,在逐渐恢复其pH值和添加补充Zn2+后, TRAIL三聚体又能重新形成。最后,通过改变TRAIL蛋白三聚体的含量,研究了三聚体对TRAIL生物活性的影响。结果表明：三聚体对TRAIL蛋白的活性起着至关重要的作用,三聚体含量由25.8%增加74.9%时, TRAIL的生物活性也相应提高,ED50由3.43×10-5mg/mL降低至1.06×10-5mg/mL。上述结果为提高TRAIL蛋白溶液储藏和制剂稳定性提供一定参考依据。
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