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玉米是全球最重要的粮食、饲料和能源燃料作物。干早胁迫是植物生长和发育最重要的限制因素之一,玉米是对水分较敏感的作物。为了进一步探讨ZmERD4基因的功能,本研究构建了ZmERD4基因的过表达载体、RNAi干扰载体和诱导载体,并通过农杆菌介导转化玉米幼胚、胚性愈伤及茎尖分生组织,以获得抗旱转基因玉米新材料。另外,本研究利用农杆菌介导转化45个玉米自交系的幼胚筛选出13个植株再生率和转化率高低不同的玉米基因型,分别是:10MZ54、6AT、10MZ255、澄海701母本、HL6、B73、:X29010-3102、C103、辽5110、A×B、综3和2041(自选自交系)。
另外通过对不同类型愈伤压片观察,判断出易分化的愈伤形状。以上述45种材料的幼胚和A~B的胚性愈伤作受体材料,获得T0代再生植株149株,以149株的基因组DNA为模板,用引物BarF和BarR进行PCR检测,扩增出含有Bar基因单株55株,PCR阳性率为36.9%;采用特异引物ERD4—1634S和NOSUTR-141A进行PCR扩增检测目的基因,共检测到42株阳性植株,其阳性率28.2%;以郑58茎尖分生组织作为受体材料,获得再生植株32株,Bar基因检测阳性率为15.6%,特异性引物目的基因检测阳性率为6.3%。以上结果表明,ZmERD4基因已被导入玉米基因组中,即获得了转ZmERD4基因玉米植株。