【摘 要】
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CpG-ODN是含有未甲基化的胞嘧啶(C)鸟嘌呤(G)二核苷酸的寡聚脱氧核糖核苷酸(ODN)。CpG-ODN的作用有两方面,一是刺激B淋巴细胞增殖并分泌抗体;二是激活单核细胞分泌细胞因子,进而
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CpG-ODN是含有未甲基化的胞嘧啶(C)鸟嘌呤(G)二核苷酸的寡聚脱氧核糖核苷酸(ODN)。CpG-ODN的作用有两方面,一是刺激B淋巴细胞增殖并分泌抗体;二是激活单核细胞分泌细胞因子,进而导致自然杀伤细胞的辅助T细胞(T helper1-type,Th1)激活,引发Th1特征的体液和细胞免疫反应。目前已被用于诱导天然保护性免疫、抗肿瘤治疗、过敏性疾病治疗、疫苗佐剂、基因治疗等多个领域。
本文以初生仔猪为研究对象,将CpG-ODN以肌肉注射和滴鼻免疫两种不同免疫途径免疫仔猪,并给予不同的免疫剂量,通过分析免疫前后不同时间相关的免疫分子及免疫细胞,确定CpG-ODN免疫初生仔猪的最佳途径和给药剂量,明确CpG-ODN在仔猪先天性免疫应答能力中的作用。
本文通过酶联免疫吸附试验、淋巴细胞增值转化能力试验、细胞因子测定、实时荧光定量PCR、流式细胞术等技术,对CpG-ODN可能影响的多种免疫细胞和分子进行了研究,包括B细胞的抗体分泌能力、淋巴细胞的刺激指数、系统和当地Th1和Th2型细胞因子表达量、趋化因子及主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)表达量、白细胞分化抗原(CD)的含量。发现CpG-ODN能显著提高初生仔猪血清中的抗体含量,刺激外周血淋巴细胞增殖,上调Th1型细胞因子的表达水平,下调Th2型细胞因子的表达水平,并使Th2型免疫应答向Th1型转变;同时,CpG-ODN还可以显著提高趋化因子的表达量,提高MHC-Ⅱ的抗原递呈能力,减缓CD4+/CD8+比值的下降。而CpG-ODN能综合有效发挥这些免疫作用的最佳途径是滴鼻免疫,肌肉注射较弱;最适给药剂量是100μg/kg,与对照组差异显著。
试验结果说明,CpG-ODN能有效刺激初生仔猪的免疫系统,提高机体的体液免疫和细胞免疫的应答能力,提高系统和当地的免疫应答能力,增加先天性免疫应答能力,对维持初生仔猪机体健康,起到非常重要的作用。目前,CpG-ODN的免疫刺激活性研究主要集中在小鼠和人上,对其他动物包括畜禽类的研究相对较少。因此,本文的研究结果将为CpG-ODN在畜禽疫病防治中的应用奠定基础。
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