【摘 要】
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研究目的：观察siRNA靶向VEGF联合紫杉醇对子宫内膜癌Ishikawa细胞株的影响。研究方法：设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),采用阳离子脂质体LipfectamineTM2000将siRNA片段导
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研究目的：观察siRNA靶向VEGF联合紫杉醇对子宫内膜癌Ishikawa细胞株的影响。研究方法：设计针对VEGF基因的小干扰RNA(siRNA),采用阳离子脂质体LipfectamineTM2000将siRNA片段导入Ishikawa细胞中；MTT法检测不同浓度紫杉醇对细胞增殖的影响；将Ishikawa细胞分为空白对照组、siRNA-N转染组、siRNA-VEGF转染组、紫杉醇组、siRNA-VEGF转染+紫杉醇组,采用Realtime-PCR和Westernblotting分别检测VEGF在mRNA和蛋白水平上表达的变化,用流式细胞技术检测凋亡率及细胞周期分布情况；用Transwell小室检测细胞体外侵袭能力。研究结果：siRNA-VEGF转染组、紫杉醇组和siRNA-VEGF转染+紫杉醇组均可明显下调Ishikawa细胞VEGF分子表达水平,抑制细胞增殖,诱导凋亡,降低细胞侵袭能力,且siRNA-VEGF转染+紫杉醇组作用最显著。对细胞周期的影响表现为紫杉醇组和siRNA-VEGF转染+紫杉醇组细胞阻滞在G2/M期；siRNA-VEGF转染组细胞阻滞在G0/G1期。而作为对照的错义序列siRNA-N转染组和空白对照组则没有上述效应。结论：靶向VEGF的siRNA可有效下调VEGF的表达；siRNA-VEGF转染细胞联合紫杉醇具有协同效应,可显著降低Ishikawa细胞VEGF的表达,抑制细胞增殖,降低细胞侵袭能力,将细胞周期阻滞于G2/M期促进细胞凋亡；紫杉醇除具一般抗癌作用外还能下调VEGF的表达,可作为新的血管抑制剂。
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