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在课题组前期工作的基础上，我们发现4.1家族成员与NECL家族成员存在相互作用而且其直接影响着NECL家族成员功能。蛋白4.1家族共有5个成员，分别为4.1N,4.1B,4.1R,4.1G,4.1DAL，其中4.1DAL是4.1B的一个较短转录本。蛋白4.1家族是一类联系胞膜蛋白（包括粘附分子、受体与离子通道）与胞内蛋白（包括信号分子、骨架蛋白、转录因子等）的骨架蛋白，是形成功能复合体不可缺少的分子。从结构角度来讲，蛋白4.1家族的30kDa膜结合结构域是起这种联系作用的关键结构域。蛋白4.1家族的成员均是通过30kDa膜结合结构域与膜蛋白胞内区发生相互作用。4.1家族所有成员均有三个共同的结构域，即位于氨基端的膜结合结构域(MBD)，血影蛋白、肌动蛋白结合结构域(SABD)以及较为保守的羧基端结构域(CTD)。
而在神经系统有表达的是4.1N,4.1R与4.1B。其中4.1N与4.1B为脑特异性表达，而4.1R表达较为广泛，但是在脑内主要表达在一些特异的神经核团，所以也是我们主要的研究对象。我们用三个基因特异的探针，通过原位杂交的方法观察其在胚胎期的不同时间点上在脑内的分布情况。再结合实验室前期NECL家族成员在同一时空点上的表达情况可以更好地为我们研究二者功能上的相关性提供证据和线索。
全反式维甲酸目前在临床上是一种抗肿瘤的药物并得到了广泛的应用，可以有效诱导肿瘤细胞的调亡与分化，并且研究发现它对皮肤病也有一定的治疗作用。但是，如果孕妇在妊娠期使用，会增加胎儿患神经管畸形的风险。目前，研究发现，通过对模式动物小鼠在胚胎期特定时间点进行全反式维甲酸诱导处理，可以获得与人类表型相似的神经管缺陷模型，从而为研究这一危害人类健康的疾病提供了有力的手段。
本文以全反式维甲酸为诱导物，通过对受孕的ICR品系小鼠在胚胎发育阶段特定时间点进行处理，从而成功构建出神经管缺陷小鼠模型，有助于我们更好地认识神经管发育缺陷的分子机理。结合芯片结果分析发现，四个神经系统相关基因：ASH2L,HDAC4,NSPC1与DOK5，与对照组相比，其表达情况在处理组中变化比较明显，于是我们对其在转录和翻译水平的变化情况进行了研究。
运用Real-timePCR以及WestemBlotting技术检测了ASH2L，HDAC4，NSPC1与DOK5在mRNA水平与蛋白水平的变化情况，并做了相应统计学分析，发现这四个基因均表现出处理组胎鼠的神经系统中下调，且变化比较明显。
这一结果提示我们ASH2L，HDAC4，NSPC1与DOK5在全反式维甲酸诱导的神经管缺陷模型中可能是潜在的效应基因，为我们研究它们在致病过程中所发挥的具体生物学功能打下了基础。