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目的:对照研究透明质酸酶(HA)联合纤溶酶(PL)及软骨素酶(CA)联合基质金属蛋白酶3(MMP-3)诱导兔眼玻璃体液化及玻璃体后脱离(PVD)的快速性、安全性、有效性,以期探索一种快速、安全、有效的药物构建玻璃体液化模型的新方法。
方法:通过完全随机分组法将24只新西兰白兔分成3组,A组11只,B组11只,C组2只作为空白组,A组和B组白兔均以右眼为实验眼,左眼为对照眼。两组实验眼分别注射20IU HA+1IU PL及0.2U CA+10ng MMP-3于视盘前玻璃体后1/3处,两组对照眼相同部位注射BSS0.1ml,C组不做任何处理。注药前后,进行肉眼、裂隙灯显微镜(+90D前置镜)、间接检眼镜和眼部B超检查。注射后3、7、14天摘除眼球,进行冰冻切片行HE染色、免疫组化及免疫荧光观察。
结果:A组实验眼于注射后3、7、14天分别有3/11、6/9、7/7的兔眼形成不同程度的PVD,其中分别有0/11、0/9/、5/7的兔眼形成完全性PVD;B组实验眼于注射后3、7、14天分别有4/11、9/9、7/7的兔眼形成不同程度的PVD,其中分别有0/11、8/9/、7/7的兔眼形成完全性PVD;在两组对照组中仅各有1只兔眼发生了小范围玻璃体液化及非常局部的PVD。实验组及对照组均未见明显视网膜异常。A组实验眼与B组实验眼注射后3、7、14天形成PVD相比,差异无统计学意义(P>0.016),在注射后7天比较完全性PVD及部分性PVD时,两组实验眼之间的差异具有统计学意义(p=0.001),与对照组形成的PVD相比,差异均有显著统计学差异(P<0.016)。A组药物注射后3、7、14天形成的PVD进行比较时,发现3天与14天形成PVD差异有显著统计学意义(p=0.004);B组药物注射后3、7、14天形成的PVD进行比较时,发现3天与7天形成PVD差异有显著统计学意义(p=0.005),比较3天与7天形成完全性PVD及部分性PVD时,差异有显著统计学意义(p=0.007);3天与14天形成PVD差异有统计学意义(p=0.013)。HE染色显示:A组及B组实验眼视网膜结构清晰完整,排列整齐,未见视网膜异常。免疫组化和免疫荧光结果显示:A组及B组实验眼注射后逐渐出现玻璃体中的II型胶原纤维染色稀疏、减少甚至部分消失,胶原纤维的网状支架结构收缩及塌陷。
结论:玻璃体内注射20IU HA+1IU PL及注射0.2U CA+10ng MMP-3均对视网膜和其他眼内组织是安全的,且均可有效地诱导PVD。两组药物诱导兔眼玻璃体液化总体结果基本一致,但0.2U CA联合10ng MMP-3诱导玻璃体液化及PVD更具快速性且在第7天诱导效果更佳。因此,0.2U CA联合10ng MMP-3所致兔眼玻璃体液化效果更为快速、安全、有效。
方法:通过完全随机分组法将24只新西兰白兔分成3组,A组11只,B组11只,C组2只作为空白组,A组和B组白兔均以右眼为实验眼,左眼为对照眼。两组实验眼分别注射20IU HA+1IU PL及0.2U CA+10ng MMP-3于视盘前玻璃体后1/3处,两组对照眼相同部位注射BSS0.1ml,C组不做任何处理。注药前后,进行肉眼、裂隙灯显微镜(+90D前置镜)、间接检眼镜和眼部B超检查。注射后3、7、14天摘除眼球,进行冰冻切片行HE染色、免疫组化及免疫荧光观察。
结果:A组实验眼于注射后3、7、14天分别有3/11、6/9、7/7的兔眼形成不同程度的PVD,其中分别有0/11、0/9/、5/7的兔眼形成完全性PVD;B组实验眼于注射后3、7、14天分别有4/11、9/9、7/7的兔眼形成不同程度的PVD,其中分别有0/11、8/9/、7/7的兔眼形成完全性PVD;在两组对照组中仅各有1只兔眼发生了小范围玻璃体液化及非常局部的PVD。实验组及对照组均未见明显视网膜异常。A组实验眼与B组实验眼注射后3、7、14天形成PVD相比,差异无统计学意义(P>0.016),在注射后7天比较完全性PVD及部分性PVD时,两组实验眼之间的差异具有统计学意义(p=0.001),与对照组形成的PVD相比,差异均有显著统计学差异(P<0.016)。A组药物注射后3、7、14天形成的PVD进行比较时,发现3天与14天形成PVD差异有显著统计学意义(p=0.004);B组药物注射后3、7、14天形成的PVD进行比较时,发现3天与7天形成PVD差异有显著统计学意义(p=0.005),比较3天与7天形成完全性PVD及部分性PVD时,差异有显著统计学意义(p=0.007);3天与14天形成PVD差异有统计学意义(p=0.013)。HE染色显示:A组及B组实验眼视网膜结构清晰完整,排列整齐,未见视网膜异常。免疫组化和免疫荧光结果显示:A组及B组实验眼注射后逐渐出现玻璃体中的II型胶原纤维染色稀疏、减少甚至部分消失,胶原纤维的网状支架结构收缩及塌陷。
结论:玻璃体内注射20IU HA+1IU PL及注射0.2U CA+10ng MMP-3均对视网膜和其他眼内组织是安全的,且均可有效地诱导PVD。两组药物诱导兔眼玻璃体液化总体结果基本一致,但0.2U CA联合10ng MMP-3诱导玻璃体液化及PVD更具快速性且在第7天诱导效果更佳。因此,0.2U CA联合10ng MMP-3所致兔眼玻璃体液化效果更为快速、安全、有效。